腺病毒载体介导共刺激分子B7.1基因对儿童肝母细胞瘤体外生物学特性的影响

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实验背景和目的：人体的抗肿瘤免疫以T细胞介导的细胞免疫为主，T细胞的活化需双信号刺激：第一信号由T细胞抗原受体(TCR)与抗原提呈细胞(A PC)上的抗原肽-MHC分子复合物结合提供，第二信号由A PC上的共刺激分子与T细胞上的相应配体结合提供。只有双信号共同刺激才能有效激活特异性的T细胞，缺乏第二信号造成T细胞克隆凋亡，使肿瘤细胞产生免疫逃避。A PC上的共刺激分子主要是一些粘附分子，其中B7-1分子是重要的粘附分子。肝母细胞瘤被认为是一种弱免疫原性的恶性肿瘤，肿瘤细胞表面缺乏足够的可以与淋巴细胞表面结合的配体，主要是指B7-1(CD80)和B7-2(CD86)，其中缺乏B7-1分子的表达是其无法提供第二信号的重要原因。我们希望通过基因转染的技术手段达到提高肝母细胞瘤细胞表面的B7-1分子抗体表达水平，恢复其传导第二信号刺激的能力，从而诱导特异性抗肿瘤免疫反应的目的。为此，我们进行了以下的实验研究。 1．检测肝母细胞瘤细胞中B7-1分子的表达水平。 2．通过含hB7-1基因的重组腺病毒载体转染肝母细胞瘤细胞株，建立B7-1分子高表达的阳性克隆。 3．观察转染后肿瘤细胞B7-1分子的表达水平及细胞生物学特性的变化4．观察转染含hB7-1基因的瘤苗对T淋巴细胞增殖的影响。实验方法：通过含hB7-1基因的重组腺病毒载体转入HepG2细胞，流式细胞仪(FCM)检测HepG2和HepG2/hB7-1细胞表面B7-1分子的表达水平。观察HepG2和HepG2/hB7-1细胞的生长曲线。用混合淋巴细胞培养法检测瘤苗对T淋巴细胞增殖的影响. 结论： 1．HepG2表面B7-1分子的低水平表达是其弱免疫原性的主要原因。 2．含hB7-1基因的重组腺病毒载体转染HepG2可以获得B7-1分子高表达的阳性克隆。 3．含hB7-1基因的重组腺病毒载体的转染肿瘤细胞后可以降低肝母细胞瘤细胞的恶性表征。 4．含hB7-1基因的重组腺病毒载体的瘤苗可以促进淋巴细胞的增殖。

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作者
王斌;
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作者单位

中国医科大学;

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授予单位中国医科大学;
学科小儿外科
授予学位硕士
导师姓名刘磊;
年度 2007
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总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类肝肿瘤;肿瘤治疗学;
关键词
肝母细胞瘤; B7-1基因; T淋巴细胞; 混合淋巴细胞培养; 细胞免疫;

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