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蒙古马主要性格性状及其候选基因的行为遗传学研究

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论文说明:图表目录、缩略词表

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1引言

1.1动物的主要行为性状

1.1.1反应

1.1.2摄食

1.1.3身体照料

1.1.4运动行为

1.1.5探求行为

1.1.6领地行为

1.1.7攻击行为

1.1.8通讯行为

1.1.9亲缘识别

1.1.10休息与睡眠

1.1.11社会协调

1.1.12马的主要行为特征

1.2行为遗传学研究进展

1.2.1行为的遗传

1.2.2行为的遗传方式

1.2.3性格行为的遗传学研究

1.2.4性格行为分子遗传学研究

1.3行为测试方法学研究进展

1.3.1常用马性格行为测试方法

1.3.2行为测试方法的基本要求

1.4数量性状QTL定位研究进展

1.4.1标记-QTL连锁分析

1.4.2标记-QTL连锁分析在行为分子遗传学研究中的应用

1.4.3候选基因法

1.5性格行为性状候选基因研究进展

1.5.1血清素能系统相关基因

1.5.2多巴胺能系统相关基因

1.5.3神经递质一元胺代谢系统相关基因

1.5.4神经-内分泌系统中肾上腺皮质激素受体基因

1.5.5生命信息分子的一氧化氮合酶基因

1.6候选基因研究的分子标记研究方法

1.6.1限制性酶切片段长度多态性

1.6.2微卫星多态性

1.6.3随机扩增多态DNA

1.6.4 DNA单链构象多态性

1.6.5扩增片段长度多态性

1.6.6 DNA芯片生物技术

1.6.7 DNA序列测定

1.7本研究动物材料的基本概况

1.7.1品种历史

1.7.2品种特征

1.8本论文的研究内容

1.9本研究的选题依据

1.10本研究的技术路线

1.11本研究课题的意义

2研究一问卷调查研究

2.1材料与方法

2.1.1实验动物

2.1.2问卷调查的实施过程

2.1.3实验数据的统计方法

2.2结果与分析

2.2.1评价者之间的一致性

2.2.2各项目间的相关系数

2.2.3性别、年龄、用途与马匹性格行为关系

2.2.4因子分析

2.2.5性别、年龄及用途与各因子之间的关系

2.3讨论

2.3.1实验动物群体的选择

2.3.2评价者之间的一致性

2.3.3多重检验的显著水平

2.3.4性别、年龄、用途对性格行为的影响

2.3.5因子分析

2.4结论

3研究二 生理学测试研究

3.1材料与方法

3.1.1实验动物

3.1.2主要仪器设备

3.1.3生理学测试过程

3.1.4实验数据的统计方法

3.2结果与分析

3.2.1心率

3.2.2心率与性别的关系

3.2.3行为观测

3.2.4生理学测试与问卷调查的相关性分析

3.3讨论

3.3.1实验方案的设计

3.3.2实验项目有效性

3.3.3心率

3.3.4心率与性别间相关性

3.3.5行为观测

3.3.6相关性检验方法

3.3.7相关性分析

3.4结论

4研究三 性格候选基因多态性与马行为性状的关联分析

4.1实验材料

4.1.1实验样品

4.1.2所用仪器设备

4.1.3主要试剂及来源

4.1.4常用溶液及试剂的配制

4.2实验方法

4.2.1基因组DNA的提取与检测

4.2.2序列扩增

4.2.3候选基因多态位点的检测

4.3数据分析

4.3.1序列分析

4.3.2基因多态性的统计方法

4.3.3性格候选基因多态性结果与问卷调查结果间相关性分析

4.4结果与分析

4.4.1基因组DNA的提取与检测结果

4.4.2蒙古马性格候选基因多态性分析结果

4.4.3候选基因多态性与蒙古马性格行为间的相关分析

4.5讨论

4.5.1基因组DNA的提取

4.5.2关于PCR-SSCP方法

4.5.3关于PCR-RFLP方法

4.5.4马性格候选基因的多态性分析

4.5.5性格候选基因多态性与问卷调查中行为参数之间相关性

4.5.6 DRD4基因多态性与性格的关系

4.6结论

全文总结论

创新之处

致 谢

参考文献

附录

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摘要

本研究以世界上最古老的马地方品种之一的蒙古马为研究对象,采用问卷调查和生理学测试方法,测试其几个主要性格行为性状。同时应用PCR—SSCP、PCR—RFLP等技术手段分析BDNF、 DBH、 SLC6A4、COMT、 MAOB等性格候选基因8个片段的单核苷酸标记,测序后提交GenBank,登录号分别为:FJ913852~FJ913859。研究蒙古马主要性格行为性状及其候选基因之间的联系,以寻找蒙古马主要性格行为性状相关的分子标记,为建立蒙古马性格行为性状的分子标记辅助选育方法奠定理论基础。 通过综合研究得出以下结论:(1)问卷调查方法对于测试马匹的性格行为性状方法有效。评价者的回答之间一致性较强。(2)母马的性格行为特征与其他马有明显区别,3岁以下的马学习能力较强,适宜开始进行训练。(3)应用因子分析方法对马性格行为问卷调查的各行为指标进行归类,得到5个因子,第一主因子、第二主因子和第三主因子中所包含的行为变量高度相关。因子分析结果反映了蒙古马的行为模式和行为特点。(4)本研究中实验房间(马厩)的中间位置悬挂黄色气球,墙壁上粘贴红、黄相间的条幅,在这样的新奇环境中马匹的绝大多数生理指标在实验刚开始时表现为突然增加,表明这样的评价系统已通过测试,用以评估焦虑状况是合理的。(5)问卷调查统计分析结果中的因子1,即焦虑性状与马匹在生理学测试中的心率、△心率和排粪次数显著相关。(6)心率变化与性别具有相关性,母马在新奇环境中心率上升明显比骟马和公马快。(7)本研究中PCR—SSCP与PCR—RFLP对蒙古马性格候选基因的分析,结果表明DBH(1)、DBH(2)、MAOB基因片段为中度多态,具有合适信息。其他基因片段为低度多态,包含很少信息。DBH(1)、DBH(2)、MAOB基因片段成为较为理想的遗传标记,使连锁分析不但可行而且有效。(8)计算各基因片段变异位点的X2值结果表明仅SLC6A4(1)、SLC6A4(2)、SLC6A4(3)的多态位点处于Hardy—Weinberg平衡状态,提示SLC6A4基因上的三处多态位点已达到遗传平衡,在以后的进化过程中这些位点的基因型也会稳定遗传下去。(9)相关性分析表明BDNF基因C222T和G261C显著影响蒙古马的咬人行为;DBH(1)基因G758A显著影响蒙古马的忍耐力和对其他马友好的行为,对理解力、沙浴、过河和游泳、识途性和群居性等行为影响极显著;COMT基因G217A显著影响蒙古马的竞争性行为;SLC6A4(1)基因T1362C显著影响蒙古马的神经质、恐慌性、惊慌型、胆怯性、对马具的反应和易捕捉度等行为,对独立性行为影响极显著;SLC6A4(3)基因AT1615-1616GC显著影响蒙古马的情绪性行为。(10)蒙古马BDNF基因C222T和G261C和SLC6A4(1)基因T1362C主要影响问卷调查分析中的第一主因子,即焦虑性状;蒙古马DBH(1)基因G758A和COMT基因G217A主要影响问卷调查分析中的第二主因子,即训练能力性状;蒙古马SLC6A4(3)基因AT1615-1616GC和SLC6A4(1)基因T1362C影响问卷调查分析中的第三主因子,即亲和性性状。

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