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补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6抑制血小板源性生长因子-BB诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移及其机制研究

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英文缩略词表

前言

第一部分 CTRP6 mRNA和蛋白在动脉粥样硬化斑块组织和正常动脉组织中的表达水平,及pcDNA3.1-CTRP6 重组质粒在PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞中CTRP6的表达

1. 材料与方法

1.1 主要仪器和设备

1.2 主要试剂

1.3 物品处置和常用试剂的配置

1.4 病例选择与人主动脉平滑肌细胞

1.5 qRT-PCR技术检测动脉硬化斑块组织和正常动脉组织的CTRP6 mRNA表达水平,及在血管平滑肌细胞被PDGF-BB诱导前后的表达差异

1.6 Western Blot技术检测动脉硬化斑块组织和正常动脉组织CTRP6蛋白表达水平,及在血管平滑肌细胞被PDGF-BB诱导前后的表达差异

1.7 重组质粒和载体质粒的大量提取

1.8 pcDNA3.1-CTRP6重组质粒转染血管平滑肌细胞

1.9 统计分析

2.结果

3.讨论

4.结论

第二部分 CTRP6对血管平滑肌细胞增殖、迁移影响的研究

1.材料和方法

1.1 主要仪器和设备

1.2主要试剂

1.3 pcDNA3.1-CTRP6 重组质粒对动脉平滑肌细胞增殖的影响(MTT实验)

1.4 pcDNA3.1-CTRP6 重组质粒对动脉平滑肌细胞垂直迁移能力的影响(Transwell细胞迁移实验)

1.5 pcDNA3.1-CTRP6 重组质粒对动脉平滑肌细胞穿膜能力的影响(Transwell细胞侵袭实验)

1.6 pcDNA3.1-CTRP6 重组质粒对动脉平滑肌细胞水平迁移能力的影响(细胞划痕试验)

1.7 不同浓度的外源性CTRP6对动脉平滑肌细胞迁移能力的影响

1.8 不同浓度的外源性CTRP6对人动脉平滑肌细胞增殖能力的影响

1.9 统计学处理

2.结果

4.讨论

4.结论

第三部分 CTRP6抑制PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移的可能机制研究

1. 材料与方法

1.1 主要仪器和设备

1.2 主要试剂

1.3 过表达CTRP6对 PDGF-BB刺激的HASMCs收缩蛋白分子(α-SMA和SM22α的)表达的影响

1.5 过表达CTRP6在PDGF-BB诱导HASMCs中对PI3K/Akt/mTOR信号通路激活的影响

1.6 过表达CTRP6在PDGF-BB诱导HASMCs不同时间点对PI3K/Akt/mTOR信号通路激活的影响

1.7 统计学处理

2. 结果

2.1 CTRP6 过表达能促进PDGF-BB诱导VSMCs收缩型分子标志的表达

2.2 外源性CTRP6 以浓度依赖型促进PDGF-BB诱导VSMCs收缩型分子标志的表达

2.3 在PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞中过表达CTRP6抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路激活

3. 讨论

4. 结论

全文结论

参考文献

附录

致谢

综述:补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白家族成员与动脉粥样硬化关系的研究进展

参考文献

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