H2S与大鼠大脑中动脉平滑肌细胞内皮衍生超极化因子介导的超极化反应的关系

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硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)是一种具有臭鸡蛋样气味的有毒无色气体。但近年来研究发现哺乳动物体内能够内源性合成H2S,H2S被认为是继一氧化氮(nitric oxide,NO)和CO后的第3种内源性气体信号分子,并且参与调节体内许多生理病理过程。内皮衍生超极化因子(endothelium-derived hyperpolarizing factor,EDHF)是一种内皮依赖性的血管舒张因子,是除NO和前列环素(prostacyclin,PGI2)外控制血管自我稳定性的第三种舒张血管的自体活性物质。本室近期研究表明大鼠脑基底动脉上的EDHF反应可能为H2S所致。大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)是大脑一种很重要的供血血管,因此,本文就EDHF介导大鼠MCA平滑肌细胞静息膜电位的超极化作用进行了研究,探讨H2S在大鼠MCA中是否具有EDHF反应的特征。　　目的:　　探讨大鼠MCA中EDHF介导的平滑肌细胞(VSMC)的静息电位超极化作用与H2S的关系。　　方法:　　1.采用细胞内电位记录实验方法,记录大鼠离体MCA的VSMC静息电位。　　2.通过阻塞大鼠MCA制备局脑缺血再灌注模型。观察脑缺血再灌注大鼠的神经功能症状和脑组织的H2S含量。　　3.先用免疫磁珠法分离获得大鼠MCA内皮细胞,采用RT-PCR的方法检测有无内源性合成硫化氢的酶-CSE的mRNA表达。　　结果:　　1.用NO合酶抑制剂(L-NAME,3×10-5mol/L)和前列环素(PGI2)合成酶抑制剂(Indo,10-5mol/L)预处理后,10-7~10-4.5mol/LACh可使大鼠MCA的VSMC发生浓度依赖性超极化作用。钙激活钾通道的阻断剂四乙胺(TEA,1×10-3mol/L)或H2S合成酶(胱硫醚-γ-裂解酶,CSE)的抑制剂PPG(10-4mol/L)均可明显取消这种非NO、非PG2介导的超极化。　　2.H2S供体NaHS(10-5~10-2.5mol/L)对大鼠MCA的VSMC产生浓度依赖性的超极化作用,而1×10-3mol/LTEA可以抑制其超极化作用。　　3.合成硫化氢的底物L-Cys(10-5-10-2.5mol/L)对大鼠MCA的VSMC可产生浓度依赖性的超极化作用;但去除大鼠MCA内皮几乎可完全取消L-Cys对平滑肌细胞膜电位的超极化作用,在内皮完整大鼠MCA上,1×10-4mol/LPPG几乎完全取消L-Cys对该血管平滑肌细胞膜电位的超极化作用。　　4.利用RT-PCR技术检测了正常大鼠MCA内皮细胞中有CSE的mRNA表达。　　5.局脑缺血大鼠脑组织中的H2S含量较正常大鼠增加,在局脑缺血再灌注大鼠的MCA上由EDHF介导的超极化作用明显增强。　　结论:　　在大鼠MCA上,H2S可能涉及由EDHF介导的平滑肌细胞超极化作用,在脑缺血再灌注大鼠的MCA上非NO、非PGI2介导的平滑肌细胞超极化作用,即EDHF反应有明显增强。

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作者
蔡圣年;
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作者单位

安徽医科大学;

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授予单位安徽医科大学;
学科药理学
授予学位硕士
导师姓名陈志武;
年度 2011
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类
关键词
内皮源性超极化因子,硫化氢,动脉平滑肌细胞,超极化反应,缺血再灌注损伤;

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