声明
缩略词表
第一章 引言
1.1抗菌肽
1.2抗菌肽的分类
1.2.1昆虫抗菌肽
1.2.2鱼类抗菌肽
1.2.3两栖类抗菌肽
1.2.4哺乳类抗菌肽
1.2.5植物抗菌肽
1.3抗菌肽的抑菌机理
1.3.1膜损伤机制
1.3.2损伤胞内物质机制
1.4抗菌肽的生物学活性
1.4.1抗细菌活性
1.4.2抗真菌活性
1.4.3抗病毒活性
1.4.4抗寄生虫活性
1.4.5免疫调节活性
1.5抗菌肽的应用前景
1.5.1在养殖业中的应用
1.5.2在食品贮存中的应用
1.5.3在医药方面的应用
1.6抗菌肽的生产制备
1.6.1 生化提取法
1.6.2化学合成法
1.6.3基因工程法
1.7本文研究内容和意义
1.7.1研究内容
1.7.2研究意义
第二章 牛乳铁蛋白肽 LfcinB 与红色荧光蛋白DsRed2在酿酒酵母中的融合表达
2.1引论
2.2 材料
2.2.1 主要仪器设备
2.2.2质粒与菌株
2.2.3主要试剂
2.2.4主要溶液剂配制
2.3实验步骤
2.3.1引物的设计与合成
2.3.2目的基因的PCR扩增
2.3.3目的基因的平末端连接
2.3.4融合蛋白基因的PCR扩增
2.3.5载体质粒的构建
2.3.6大肠杆菌感受态细胞的制备
2.3.7大肠杆菌DH5α感受态细胞重组质粒的转化
2.3.8筛选阳性克隆
2.3.9酿酒酵母W303、INVSc1感受态细胞的制备
2.3.10 重组质粒转化酿酒酵母
2.3.11工程菌的诱导表达
2.3.12表达产物的抑菌活性检测
2.3.13表达产物的热敏感与碱敏感性检测
2.3.14荧光检测
2.3.15表达产物的纯化
2.3.16 SDS-PAGE 凝胶电泳检测表达产物
2.3.17表达产物沉淀重溶、透析后抑菌活性检测
2.4实验结果
2.4.1目的片段的扩增与重组质粒的构建
2.4.2表达产物的抑菌活性
2.4.3表达产物的热敏感性与碱敏感性
2.4.4重组酵母菌荧光检测
2.4.5重组酵母菌的生长曲线
2.4.6 SDS-PAGE 蛋白电泳
2.4.7表达产物沉淀重溶、超滤、透析过后的抑菌活性
2.5总结与讨论
第三章 天然前导肽与 Cherry 对抗菌肽活性抑制效果的对比及提高原核表达产量的策略
3.1引论
3.2材料与试剂
3.2.1 主要仪器设备
3.2.2菌株与质粒
3.2.3主要试剂
3.2.4常用试剂配制方法
3.3实验方法
3.3.1引物的设计与合成
3.3.2目的基因的PCR扩增
3.3.3目的基因与质粒pET22b（+）的酶切
3.3.4目的基因与质粒pET22b（+）的连接
3.3.5连接产物转化大肠杆菌BL21感受态细胞
3.3.6筛选阳性克隆
3.3.7工程菌的诱导表达
3.3.8表达产物的SDS-PAGE凝胶电泳检测
3.4实验结果
3.4.1目的片段的扩增与重组质粒的构建
3.4.2重组大肠杆菌的生长曲线
3.4.3 SDS-PAGE 蛋白电泳
3.5结果与讨论
第四章 小结
参考文献
攻读硕士学位期间取得的研究成果
致谢
安徽大学;
