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芒果叶提取物—芒果苷联合麻黄碱对过敏性哮喘的增效减副作用研究

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引言

正文

第一部分 芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的药效学研究

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

4 小结

第二部分 芒果苷联合麻黄碱及其联合用药对治疗过敏性哮喘的免疫分子机制初步研究

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

4 小结

讨论

1 芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的药效学研究

2芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的免疫分子机制初步研究

结论

结语

参考文献

附录

综述

致谢

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摘要

目的:运用卵白蛋白(OVA)致敏和激发的方法建立过敏性哮喘小鼠模型,观察芒果叶提取物—芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的药效作用,并进一步探讨芒果苷联合麻黄碱对Th1/Th2型细胞基因表达的影响。  方法:4~5周龄SPF级、健康BALB/c雌性小鼠110只,体重18±2g,按随机数字表法分为11组,分别为空白对照组,模型对照组,地塞米松阳性对照组(1.25mg·kg-1),芒果苷高剂量治疗组(400mg·kg-1),芒果苷低剂量治疗组(200mg·kg-1),麻黄碱高剂量组(100mg·kg-1),麻黄碱低剂量组(50mg·kg-1),芒果苷高剂量与麻黄碱高剂量联合治疗组(400mg·kg-1+100mg·kg-1),芒果苷低剂量与麻黄碱低剂量联合治疗组(200mg·kg-1+50mg·kg-1),芒果苷高剂量与麻黄碱低剂量联合治疗组(400mg·kg-1+50mg·kg-1),芒果苷低剂量与麻黄碱高剂量联合治疗组(200mg·kg-1+100mg·kg-1),每组10只。采用OVA致敏和激发构建小鼠哮喘模型。  1、芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的药效学研究:用小鼠自主活动记录仪,连续考察14天在给药1小时后小鼠的自主活动变化;观察激发时各组小鼠哮喘发作表现;细胞涂片进行外周血中白细胞分类计数;HE染色观察肺组织病理切片炎症细胞浸润情况;采用EIA法检测小鼠血清中OVA特异性IgE(OVA-sIgE)和ELISA法检测小鼠血清中cAMP的含量。  2、芒果苷联合麻黄碱对Th1/Th2型细胞因子mRNA表达水平的影响研究:采用RT-PCR法检测小鼠肺组织中Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4、IL-5、的mRNA表达水平。  3、采用SPSS17.0统计软件进行分析,Homogeneity检验方差齐性。  结果:1、芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的药效学研究:各联合给药组与麻高组相比,可明显降低小鼠的自主活动力(P<0.01);与模型组、芒高组、芒低组、麻低组比较,联合给药组可明显减轻小鼠哮喘发作表现如呛咳、呼吸急促、躁动不安、腹肌收缩、紫绀等症状(P<0.01);与模型组、麻低组比较,联合给药组能明显减少全血中嗜酸性粒细胞(EOS)比例(P<0.01);与模型组、芒低组比较,联合给药组可显著升高全血中单核细胞的比例(P<0.01);与模型组、麻低组相比,芒高+麻高、芒高+麻低、芒低+麻高组可显著降低全血中中性粒细胞的比例(P<0.01);与模型组相比,芒高+麻高、芒高+麻低组可降低全血中的白细胞总数(P<0.05~0.01)。与模型组、芒低组、麻低组比较,联合给药组均可不同程度的改善肺组织的病理学改变,减轻气道炎症(P<0.05~0.01);与模型组、芒低组、麻低组比较,联合给药组均可显著降低血清中OVA-sIgE含量(P<0.01);与模型组、芒低组、麻低组比较,芒高+麻高组、芒低+麻低组均可显著升高血清中cAMP含量(P<0.01)。  2、芒果苷对Th1/Th2型细胞因子mRNA表达的影响:RT-PCR结果显示:芒低+麻高组显著降低Th2型细胞因子IL-4 mRNA表达水平(P<0.05);联合给药组可降低Th2型细胞因子IL-5 mRNA表达水平,但与模型组相比,无显著性差异;芒高+麻高组、芒低+麻高组可显著上调Th1型细胞因子IFN-γmRNA表达水平(P<0.01)。  结论:1、芒果苷与麻黄碱联合用药可明显降低麻黄碱所致小鼠亢奋、震颤等副作用;可明显减轻在激发时哮喘小鼠发作表现、哮喘小鼠体内EOS浸润及OVA-sIgE含量、升高cAMP含量。改善肺组织病理学改变,减轻气道炎症,显示芒果苷与麻黄碱联合用药对治疗哮喘有显著的药效作用。  2、联合给药组可调节Th1/Th2型细胞因子mRNA表达,提示联合给药组治疗过敏性哮喘的免疫分子机制可能是调节 Th1/Th2型细胞因子mRNA表达。

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