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蛹虫草多糖对乳清蛋白氧化的抑制效应研究

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图表清单

1 蛋白质氧化的研究进展

1.1 蛋白质氧化的危害

1.2 蛋白质氧化的机理

1.3 蛋白质抗氧化研究

2 乳清蛋白

2.1 乳清蛋白的生产

2.2 乳清蛋白的营养价值

2.3 乳清蛋白的应用

3 虫草多糖

3.1 虫草多糖的来源

3.2 虫草多糖的分离纯化

3.3 虫草多糖的生物活性

引言

正文

1 试验材料、试剂及仪器

1.1 主要材料

1.2 主要试剂

1.3 主要仪器

2 实验方法

2.1 蛹虫草的培养

2.2 粗胞外多糖的提取

2.3 虫草多糖的纯化

2.4 多糖含量测定

2.5 多糖残留蛋白含量的测定

2.6 铁还原/抗氧化能力(FRAP法)测定

2.7 自由基(ABTS)清除能力测定

2.8 金属离子螯合能力测定

2.9 乳清蛋白氧化处理

3 结果与分析

3.1 多糖含量

3.2 残留蛋白含量

3.3 铁还原(FRAP)

3.4 自由基(ABTS)清除能力

3.5 金属离子螯合能力

3.6 虫草多糖对氧化乳清蛋白pH值的影响

3.7 虫草多糖对氧化乳清蛋白羰基含量的影响

3.8 虫草多糖对氧化乳清蛋白巯基含量的影响

3.9 虫草多糖对氧化乳清蛋白氨基酸组分的影响

4 讨论

结论

参考文献

致谢

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摘要

乳清蛋白是用牛奶生产干酪、干酪素时的副产品,其主要成分包括:α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、牛血清白蛋白、免疫球蛋白,以及其它一些微量组分,如乳铁蛋白、乳过氧化物酶等。乳清蛋白氨基酸含量均衡,必需氨基酸组成完全符合FAO/WHO的要求,易于被人体消化吸收,因此被誉为“蛋白之王”。
  为探讨蛹虫草多糖对乳清蛋白氧化的抑制作用,本研究首先提取蛹虫草胞外多糖,对其进行分离纯化及抗氧化活性鉴定;然后利用Fenton反应产生的羟基自由基,建立乳清蛋白氧化反应体系,并向反应体系中添加0.5mg/ml、1.0mg/ml、1.5mg/ml的虫草多糖,4℃下反应12h、24h、36h后终止反应。对终止反应后的乳清蛋白的理化指标和功能特性进行测定。
  虫草多糖抗氧化活性实验结果表明:所提取的纯度为51.23%虫草多糖的抗氧化活性为:1mg虫草多糖对Fe3+还原力等价于8.91μg的Vc;对ABTS自由基清除能力等价于78.55μg VE;对铜离子螯合活力等价于149.43μg EDTA-Na2;对亚铁离子螯合活力等价于37.89μg EDTA-Na2。
  虫草多糖对乳清蛋白抗氧化作用的理化指标及功能特性测定结果表明:⑴随着反应时间的延长,乳清蛋白溶液的pH值升高、羰基含量下降、巯基含量降低、蛋白紫外吸收特征降低,表现出时间-效应关系。与空白对照组相比,随着多糖含量的增加,乳清蛋白的pH值、羰基含量、巯基含量均降低,但不成剂量-效应关系;蛋白质的氨基酸总量及易受自由基攻击的氨基酸组分含量升高,蛋白溶液的紫外吸收特征升高,表现出较强的抑制乳清蛋白氧化的效果。虫草多糖处理在乳清蛋白的pH、羰基、氨基酸组成、紫外吸收特性变化中均表现出抑制乳清蛋白氧化的效应。
  随着反应时间的延长,乳清蛋白的溶解度降低;对于不同浓度多糖处理与空白对照组相比,添加1mg/ml、1.5mg/ml多糖处理组的氮溶指数显著(P<0.05)降低。氧化24h的乳清蛋白乳化活性随多糖浓度的升高而降低,乳化稳定性随多糖浓度的升高而升高,1.5mg/ml多糖处理组乳化稳定性升高显著。氧化24h的乳清蛋白的起泡能力在添加1mg/ml多糖时表现最好,但稳定性最差。氧化36h后乳清蛋白凝胶的粘度、弹性、硬度和咀嚼性都随多糖的浓度升高;而升高凝胶的白度值随多糖的浓度升高而降低;与对照组相比3个多糖处理组的持水性升高,1mg/ml多糖处理组表现最高。虫草多糖在乳清蛋白的乳化稳定性、凝胶质构和持水性中表现出抑制乳清蛋白氧化的作用。

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