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血浆微小RNA-126(miR-126)作为评估脑侧枝循环潜在生物标记物的相关性研究

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目的:探索颅内外血管狭窄患者血浆中微小RNA-126（miR-126）及其靶点转录因子Spred-1（Sprouty-related protein-1，出芽相关蛋白-1）和PIK3R2（Phosphoinositol-3kinase regulatory subunit2，磷酸肌醇3激酶调节亚单位）以及下游产物VEGF(Vascular endothelial growth factor,血管内皮生长因子)与脑侧枝循环的相关性。　　方法：本实验为前瞻性、单中心非随机对照研究。收集2017年1月至2018年1月在包头市中心医院神经内科接受脑血管造影术检查的患者。确诊患者颅内血管至少一条存在重度狭窄（大于70%）。应用ASITN／SIR血流分级系统评价进行脑血管侧枝循环分级。0-2级为侧枝循环不良组，3-4级为侧枝循环良好组。并且选取经脑血管超声、MRA或CTA排除血管狭窄的健康人群30人为健康对照组。应用ELISA（Enzyme linked immunosorbent assay，酶联免疫吸附测定）方法检测VEGF的浓度，PT-PCR（Reverse transcription-PCR,反转录PCR）检测miR-126的表达水平，蛋白印迹实验检测Spred-1和PIK3R2表达水平。　　结果：研究共纳入52例伴有脑动脉狭窄的患者，健康对照组30例，侧枝循环不良组12例，侧枝循环良好组40例。侧枝循环良好组与不良组，miR-126、VEGF均比健康对照组表达上调，Spred-1、PIK3R2均比健康对照组下调，但仅仅是侧枝循环良好组与健康对照组间的差异有显著性(P＜0.01)。侧枝循环良好组miR-126和VEGF水平明显高于侧枝循环不良组［miR-126：10.32±0.19比6.79±0.19,P＝0.0081；VEGF：(104.91±5.14)pg/L比(81.85±3.23)pg/L，P＝0.044]。侧枝循环良好组Spred-1和PIK3R2水平明显低于侧枝循环不良组（Spred-1：10.23±0.0012比0.83±0.0015,P＝0.023；PIK3R2：0.22±0.0020比0.65±0.0031，P＝0.039）。侧枝循环良好组血液中miR-126与VEGF呈正相关(r=0.712,p=0.005)，侧枝循环不良组miR-126与VEGF无相关性（r=0.342,p=0.483），侧枝循环良好组血液中miR-126与Spred-1（r=0.834，p=0.001）和PIK3R2(r=0.875,p=0.002)呈负相关。侧枝循环不良组miR-126与Spred-1(r=0.342,p=0.087)PIK3R2(r=0.433,p=0.164)无相关性。　　结论:miR-126可能成为预测脑侧枝循环建立好坏的一种血液标志物。miR-126、VEGF水平与脑侧枝循环形成呈显著正相关，与Spred-1、PIK3R2成负相关，推测其作用机制为miR-126直接作用于Spred-1、PIK3R2，通过抑制Spred-1、PIK3R2的表达，增强VEGF的血管生成作用，促进血管的形成。

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