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不同钠离子浓度高渗盐复苏液对重度烫伤大鼠肝损伤的影响

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中英文缩略词表

前言:

第一部分不同钠离子浓度高渗盐复苏液对重度烫伤大鼠肝损伤及肝细胞病理形态的影响

1材料和方法

2结果

3讨论

4结论

第二部分:不同钠离子浓度高渗盐复苏液对重度烫伤大鼠肝脏氧化应激及炎症介质表达的作用

1材料和方法

2结果

3讨论

4结论

第三部分 不同钠离子浓度高渗盐复苏液对重度烫伤大鼠肝脏细胞p38MAPK以及JNK通路的活化影响

1材料和方法

2 结果

3讨论

4结论

参考文献

附录

致谢

综述:高渗盐溶液在烧伤后补液复苏应用及对肝损伤影响的研究进展

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摘要

目的:
  本实验通过采用600mmol/L、800mmol/L、1000mmol/L三种 Na+浓度高渗钠盐液(HS)和乳酸格林钠液(LR)对重度烫伤大鼠进行液体复苏,从肝脏功能,肝组织细胞形态,炎症反应,氧化应激,炎症相关信号转导通道蛋白等方面探讨不同高渗钠盐液(HS)对大鼠重度烫伤后肝脏损伤的影响。
  方法:
  健康成年雌性SD大鼠104只,体重200-250g,随机分成五组:假伤组(8只)、其余为烫伤组包括 LR组(24只)、600HS组(24只)、800HS组(24只)、1000HS组(24只)。大鼠麻醉后扎套管针尾静脉置管,剃去背部毛发,假伤组大鼠不予烫伤及补液,拟伤后直接取腹主动脉血及肝组织;其余各组均给予大鼠背部Ⅱ°至Ⅲ°开水烫伤,伤后分别使用 LR复苏和三种不同 HS复苏。烫伤组大鼠于补液后2h、8h和24h取腹主动脉血及肝组织。
  第一部分:不同钠离子浓度高渗盐复苏液对重度烫伤大鼠肝功能损伤及肝细胞损伤的影响
  取出五组大鼠的一部分肝脏组织及血浆,使用自动生化仪检测血浆中 ALT及AST含量,肝脏组织在使用10%甲醛固定后使用 HE染色法染色观察组织细胞形态。
  第二部分:不同钠离子浓度高渗盐复苏液对重度烫伤大鼠肝脏氧化损伤及炎症因子的影响
  取出五组大鼠的一部分肝脏组织及血浆,比色法对肝组织进行丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性测定。酶联免疫吸附法(ELISA)测量血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)以及高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)。将取得数据进行统计分析。
  第三部分:不同钠离子浓度高渗盐复苏液对重度烫伤大鼠肝脏组织 p38MAPK及JNK通道活化的影响
  使用蛋白质印迹法(Western Blot)测量五组大鼠肝脏组织中 p38MAPK以及JNK通道磷酸化蛋白比值并进行统计学分析。
  结果:
  第一部分
  与假伤组相比,伤后各时间点,其余各组 ALT、AST均明显升高(P<0.01);与 LR组相比,伤后各时间点,600HS组 ALT、AST均明显降低,(P<0.01),而800HS组及1000HS组ALT、AST在伤后2、8小时未见显著变化(P>0.05),在伤后24小时800HS组及1000HS组 ALT、AST均明显降低(P<0.01);与600HS组相比,800HS组及1000HS组 ALT、AST在伤后2、8小时明显升高(P<0.01),在伤后24小时,800HS组及1000HS组ALT、AST未见显著差异(P>0.05)。肝脏组织 HE染色显示:伤后各时间点,LR组大鼠肝细胞可见明显脂肪样变,部分可见细胞水肿;伤后2、8小时 HS组大鼠随高渗盐浓度升高,上述病理变化增多;伤后24小时,三组 HS组大鼠肝脏病理变化无明显差异。
  第二部分
  与假伤组相比,伤后各时间点,LR组、800HS组和1000HS组 TNF-α与IL-1β均明显升高(P<0.01),而600HS组未见明显变化(P>0.05);与 LR组相比,伤后各时间点600HS组 TNF-α与 IL-1β均明显降低(P<0.01),800HS组和1000HS组未见显著变化(P>0.05)。伤后2小时,五组 HMGB-1无显著差异(P>0.05),伤后8、24小时,与假伤组相比,LR组、800HS组和1000HS组 HMGB-1均明显升高(P<0.01),而600HS组未见明显差异(P>0.05);与 LR组相比,各HS组HMGB-1均明显降低(P<0.01);与600HS组相比,800HS组及1000HS组HMGB-1明显升高(P<0.01)。
  与假伤组相比,伤后各时间点其余各组 MDA含量明显升高 SOD活性明显降低(P<0.01);与 LR组相比,伤后各时间点600HS组 MDA含量明显降低SOD活性明显升高(P<0.01),800HS组、1000HS组未见显著变化(P>0.05);与600HS组相比,伤后各时间点800HS组及1000HS组MDA含量明显升高SOD活性明显降低(P<0.01)。
  第三部分
  肝脏组织p38MAPK以及JNK通道磷酸化蛋白比值显示:LR组和各HS组在伤后2h、8h及24h,样本肝脏组织p38MAPK及JNK通道的活性表达均比假伤组显著升高(P<0.01);而LR组、800HS组及1000HS组p38MAPK及JNK通道活性表达均显著高于600HS组(P<0.01),而800HS组及1000HS组p38MAPK及JNK通道活性与LR组无差异(P>0.05)。
  结论:
  (1)与伤后使用LR相比,使用600mmol/L钠离子浓度的高渗盐溶液进行液体复苏能减轻但不终止大鼠的肝功能失常及肝细胞形态结构的损伤,但是随着Na+浓度升高达到800及1000mmol/L后,效果降低。
  (2)与伤后使用LR相比,使用600mmol/L钠离子浓度的高渗盐溶液进行液体复苏能减轻并部分终止重度烫伤大鼠伤后肝脏的氧化损伤以及炎症反应发生,但是随着Na+浓度升高,达到800及1000mmol/L后,效果降低。
  (3)与伤后使用LR相比,使用600mmol/L钠离子浓度的高渗盐溶液进行液体复苏能减轻但不终止肝脏组织中p38MAPK和JNK通道的激活表达,但是随着Na+浓度升高,达到800及1000mmol/L后,效果降低。

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