α-氰基丙烯酸酯与5-氟尿嘧啶复合物在预防移植静脉再狭窄中的应用研究

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目的：冠状动脉旁路移植术（CABG）是治疗冠心病（CHD）的主要手段之一，而术后移植静脉再狭窄严重影响了桥血管的通畅率和患者预后。α-氰基丙烯酸酯生物胶（α-Cyanoacrylate，α-CA）和5-氟尿嘧啶（5-fluorouraci，5-Fu）血管外局部用药对预防移植静脉内膜增生及管腔狭窄都有积极明确的效果，本研究将二者进行复合形成新的血管外支持载药应用于大鼠自体颈静脉动脉移植模型中，模拟CABG术后病理生理过程进行研究，验证新理念的可行性，为移植静脉再狭窄的治疗提供新思路和新方法。
　　方法：将48SD大鼠（雌雄不拘，周龄10-12周，体重220-280g），随机分为4组：假手术组（sham group,S）、对照组（control group,C）、胶水组（α-cyanoacrylate，α-CA）、5-氟尿嘧啶组（5-fluorouraci，5-FU），每组12只大鼠。假手术组仅模拟手术过程，进行颈外静脉游离，侧枝结扎，不断血管，不行移植；对照组行同侧颈静脉-颈动脉移植；胶水组行同侧颈静脉-颈动脉移植，移植静脉外涂抹α-CA胶；5-氟尿嘧啶组行同侧颈静脉-颈动脉移植，移植静脉外涂抹α-CA胶与5-氟尿嘧啶复合物。应用改良“CUFF”法进行建模。血清ELISA共分4个点进行检测：T0：术前，T1：术后即刻，T2：术后36小时，T3：处死日，术后4周。ELISA法进行ET-1及TNF-α的检测。术后4周处死实验大鼠，肉眼观察移植静脉的变化，取新鲜桥血管固定保存后，进行HE染色，通过显微镜及计算机图像处理软件观察测定内、中和外膜增生情况；进行αSMA免疫组织化学染色，观测血管平滑肌细胞增值及迁移情况；进行RT-PCR技术测定移植静脉αSMA的变化。
　　结果：各组手术均成功，术后观察移植静脉搏动有力，充盈良好。术后4周处死大鼠时，观察移植静脉情况，对照组一例闭塞，余血流通畅，对照组移植静脉周围有新鲜肉芽组织产生、不同程度的扩张、管壁增厚水肿稍僵硬，涂抹胶水组皆可观察到胶水未降解，移植静脉周围组织有少量肉芽组织易分离，与周围组织分界清晰，未见明显扩张。各组血清ET-1水平在0到36小时呈上升趋势，假手术组在术后4周基本恢复术前水平，而对照组、胶水组、5-fu组术后4周仍维持在各自峰值水平。术前及术后即刻两个时间点上，各组水平相当，术后36小时及术后4周各组水平开始出现差异：术后36小时及4周对照组、胶水组、5-fu组高于假手术组水平，差异有统计学意义（p<0.05）；术后36小时及术后4周胶水组和5-fu组低于对照组水平，差异有统计学意义（p<0.05）；5-fu组术后36h水平低于胶水组，差异有统计学意义（p<0.05）。各组血清TNF-ɑ水平于术后即缓慢下降。对照组于术后36小时低于相对应点的假手术组水平，差异有统计学意义（p<0.05）；胶水组及5-fu组术后36小时高于对应点的对照组水平，差异有统计学意义（p<0.05）；5-fu组术后4周高于对应点的对照组和胶水组水平，差异有统计学意义（p<0.05）； HE染色后通过计算机图像分析系统进行分析。内膜：对照组、胶水组、5-fu组厚度均高于假手术组，差异有统计学意义（p<0.05）；5-fu组厚度低于假手术组、对照组、胶水组，差异有统计学意义（p<0.05）；胶水组的厚度低于对照组，差异有统计学意义（p<0.05）。中膜：对照组厚度高于假手术组，差异有统计学意义（p<0.05）；胶水组、5-fu组厚度低于对照组，差异有统计学意义（p<0.05）。外膜：对照组厚度高于假手术组，差异有统计学意义（p<0.05）；5-fu组厚度低于对照组，差异有统计学意义（p<0.05）。αSMA免疫组织化学染色可见假手术组术后4周内膜及外膜可见少量阳性细胞；对照组术后4周内中外膜均可见大量阳性细胞表达。胶水组可见中等量阳性细胞表达，以外膜居多；5-fu组内膜阳性细胞表达少，外膜有中等量的表达。可见对照组大量平滑肌细胞迁移致内膜并增生，胶水组可减少内膜平滑肌细胞增生，平滑肌细胞向外膜迁移，5-fu组药物干预后可明显降低内膜平滑肌细胞的增生。术后4周取移植静脉行RT-PCR对αSMA进行检测，M为MARK、1为假手术组、2为对照组、3为胶水组、4为5-fu组，可见对照组表达明显增强，5-fu组和胶水组均低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。
　　结论：α-CA胶作为血管外支持物应用于大鼠静脉移植模型中，可有效减轻移植静脉内膜及中膜的增生。α-CA胶作为血管外支持物载有5-fu应用于大鼠移植静脉模型，可有效减轻内、中及外膜增生。证实了全新理念的血管外支持载药作用效果确切，具有可行性，为移植静脉再狭窄的治疗提供新思路和新方法。

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作者
孙阿雨;
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作者单位

安徽医科大学;

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授予单位安徽医科大学;
学科外科学(心胸外科)
授予学位硕士
导师姓名葛建军;
年度 2016
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类心脏;冠状动脉（粥样）硬化性心脏病（冠心病）;
关键词
冠状动脉旁路移植术; 内膜增生; 血管外支持载药; 5-氟尿嘧啶; α-氰基丙烯酸酯; 静脉再狭窄;

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