鬼针草总黄酮中试工艺及其含量测定方法的建立

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鬼针草(Bidens bipinnata L.)系菊科鬼针草属一年生草本植物,在我国大多数省区均有分布。鬼针草药用历史悠久,味苦、性平而无毒,具有清热解毒,散瘀消肿等功效,民间常用于治疗痢疾、腹泻、肝炎、胃痛等。鬼针草富含黄酮类化合物,叶中含量高达5％,主要为查耳酮类、噢哢类、黄酮醇类等。本课题组前期发现鬼针草总黄酮(total flavonoids of Bidens bipinnata L.,TFB)是保肝的有效成分,并且对TFB的制备工艺进行了初步研究。但参照按照中药五类新药的要求,中药成分的有效部位含量必须达到50%以上,因此考虑对此工艺进行优化,并进行中试放大研究,为将其开发成为治疗抗肝纤维化的中药五类新药提供实验依据。
　　具体研究内容包括以下二个部分:
　　1.鬼针草总黄酮制备工艺中试研究
　　采用正交实验法对鬼针草总黄酮提取工艺进行优化,确定乙醇提取的生产工艺为用10BV的70%乙醇回流提取2次,每次2h。再通过HPD100大孔树脂吸附纯化,吸附后先以1.5BV的水洗去杂质,再用3BV的70%乙醇进行洗脱,最后用20BV的乙醇超声提取2次。在此条件下进行吸附、洗脱,树脂可重复使用5次。在实验室研究的基础上进行三批中试放大研究,采用比色法测定总黄酮含量>50%,得率为1%。
　　应用HPLC法对鬼针草药材及其连续生产工艺提取物中金丝桃苷,异槲皮苷和鬼针聚炔苷含量进行测定。采用HPLC法,Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温30℃,以0.4%醋酸乙腈溶液和水溶液为流动相进行液相梯度洗脱,检测波长255nm,流速1.0 mL·min-1。三种物质在30min内均达到基线分离,线性关系良好(R2>0.9994,n=6),日内精密度≤1.4%。药材及其总黄酮提取物样品溶液中三种成分的平均回收率为99.08%-103.52%,RSD≤3.8%。该法操作简单,结果准确,具有较好的重复性和稳定性。
　　2.TFB质量控制初步研究
　　质量控制是中药研制工作的重点。本文采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色系统,用紫外分光光度法测定了鬼针草总黄酮提取物中黄酮的含量。TFB的含量为57.44%,平均回收率为104.17%,RSD=1.97%。该法简便、快速、重现性好,可用于TFB的质控方法。

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作者
许慧;
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作者单位

安徽医科大学;

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授予单位安徽医科大学;
学科微生物与生化药学
授予学位硕士
导师姓名陈飞虎;
年度 2012
页码
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类有效成分的分离与提取;
关键词
鬼针草; 总黄酮; 中试工艺; 含量测定;

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