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1 前言
2 材料与方法2.1 材料
2.1.1 细胞
2.1.2 试剂
2.1.3主要仪器
2.1.4主要溶剂配制
2.2方法
2.2.1建立KFs及NFs细胞系
2.2.2 MTT法检测CASE 对KFs增殖的影响
2.2.3 3H-脯氨酸掺入法检测CASE对KFs胶原的抑制作用
2.2.4 Transwell小室法检测CASE对KFs侵袭的抑制作用
2.2.5 细胞免疫荧光染色法观察CASE对TGF-β1诱导的KFs内Smad2和Smad3(包括连接区和C末端)蛋白磷酸化的抑制作用,人体正常成纤维细胞(NFs)做对照
2.3检测方法
2.3.1 MTT法
2.3.2 3H-脯氨酸掺入法
2.3.3 Transwell小室法
2.3.4 细胞免疫荧光染色法
2.3.5 数据处理 数据用x ± s表示,各组均数之间比较采用SPSS 10.0统计软件进
3 结果3.1 建立KFs及NFs细胞系
3.2 CASE 对KFs增殖的影响
3.2.1 CASE 对NBS刺激的KFs增殖抑制作用
3.2.2 CASE 对TGF-β1诱导的KFs增殖的影响
3.3 CASE对KFs胶原合成的抑制作用
3.3.1 TGF-β1对NFs胶原合成的影响
3.3.2 CASE对NBS刺激的KFs胶原合成的抑制作用
3.3.3 CASE对TGF-β1(40 pmol·L-1)刺激的KFs胶原合成的抑制作用
3.4 CASE对KFs侵袭的影响
3.4.1 CASE对NBS刺激的KFs侵袭的抑制作用
3.4.2 CASE对TGF-β1刺激的KFs侵袭的抑制作用
3.5 CASE对TGF-β1诱导的KFs内Smad2/3连接区蛋白磷酸化的抑制作用
3.5.1 CASE对TGF-β1诱导的KFs胞内pSmad2L及pSmad3L蛋白表达的影响
3.5.2 CASE对TGF-β1诱导的NFs胞内pSmad2L及pSmad3L蛋白表达的影响
4 讨论
5.结论
参考文献
附录
致谢
综述