木麻黄愈伤组织再生体系的构建和转基因研究

声明

摘要

第一章前言

1．1研究背景

1．1．1木麻黄简述

1．1．2林木的转基因研究概况

1．1．3木麻黄基因工程研究

1．1．4植物转基因技术概述

1．2目的和意义

1．3主要研究内容

1．3．1构建木麻黄愈伤组织再生体系

1．3．2构建木麻黄遗传转化体系

1．3．3木麻黄转基因植株的鉴定

1．3．4木麻黄内源耐盐基因的遗传转化

1．4技术路线

第二章建立愈伤组织再生体系

2．1．1材料

2．1．2方法

2．2结果分析

2．2．1愈伤组织的诱导与增殖

2．2．2不定芽的诱导

2．2．3不定芽生根

2．3讨论

2．3．1诱导愈伤组织的不同外植体的优缺点

2．3．2两种不同基础培养基对再生体系的影响

2．3．3植物生长调节剂对愈伤组织诱导的影响

2．4小结

第三章木麻黄农杆菌遗传转化体系的初步建立

3．1．1材料

3．1．2方法

3．1．3试验现象的观察记录及数据的收集处理

3．2．1工程菌株与共培养时间的选择

3．2．2 Car对农杆菌的生长抑制性

3．2．3 Hyg筛选体系中培养条件的研究

3．2．4 Kan筛选体系中培养条件的研究

3．3讨论

3．4小结

第四章转基因表达载体的构建

4．1．1材料和试剂

4．1．2试验方法

4．2木麻黄CeNCS2基因过表达载体构建结果

4．2．1木麻黄总RNA质量检测

4．2．2 CeNCS2基因克隆(PCR和测序结果)

4．2．3双酶切载体构建(PCR和测序结果)

4．2．1材料与试剂

4．2．2方法

4．3木麻黄CeSnRK2基因家族敲除载体构建结果

4．4小结与讨论

第五章CRISPR／Cas9系统sgRNA序列单碱基错配研究

5．1材料与方法

5．1．1材料

5．1．2方法

5．2结果分析

5．2．2水稻DST的基因编辑

5．3讨论与小结

第六章总结和展望

6．1结论

6．1．1木麻黄愈伤组织再生体系

6．1．2木麻黄遗传转化体系

6．1．3木麻黄基因表达载体的构建

6．1．4 CRISPR／Cas9系统sgRNA序列单碱基错配研究

6．2讨论

6．3展望

参考文献

附录

个人简介

致谢