通过细胞外囊泡抑制SARS--CoV--2的感染及姜黄素对细胞外囊泡的作用研究

声明

摘要

引言

第一章文献研究

1．1研究背景

1．2新冠病毒感染宿主细胞的机制

1．3细胞外囊泡作为药物载体的研究

1．4假病毒作为病毒模板的研究

1．5温敏性水凝胶延长药物停留时间

1．6姜黄素刺激亲本细胞分泌细胞外囊泡

1．7本课题研究的目的和意义

第二章携带ACE2的细胞外囊泡以及假病毒的制备及表征

2．1材料与仪器

2．1．1材料

2．1．2仪器

2．1．3细胞系

2．2实验方法

2．2．1溶液配制

2．2．2细胞培养

2．2．3过表达ACE2的HEK293T稳转株筛选

2．2．5重组融合质粒的提取及浓度测定

2．2．6假病毒的制备及相关蛋白表达验证

2．2．8细胞外囊泡的提取

2．2．9细胞外囊泡的表征

2．2．10统计学分析

2．3结果与讨论

2．3．1假病毒的表征

2．3．2细胞外囊泡的表征

2．4本章小结

第三章携带ACE2的细胞外囊泡抑制假病毒感染和安全性评价

3．1材料与仪器

3．1．1材料

3．1．2仪器

3．2实验动物

3．3实验方法

3．3．1不同肿瘤细胞株的ACE2表达

3．3．2体外抑制病毒感染实验

3．3．3DiO标记的细胞外囊泡的制备

3．3．4体内抑制病毒感染实验

3．3．5体内安全性评价

3．3．6水凝胶的制备

3．3．7水凝胶临界相变温度测定

3．3．8EVs-ACE2在水凝胶中的分布实验

3．3．9水凝胶对假病毒的体外中和实验

3．3．10统计学分析

3．4结果与讨论

3．4．1不同肿瘤细胞株的ACE2表达

3．4．2体外抑制病毒感染实验

3．4．3体外抑制病毒感染实验

3．4．4体内安全性评价

3．4．5水凝胶临界相变温度测定

3．4．6EVs-ACE2在水凝胶中的分布实验

3．4．7水凝胶对假病毒的体外中和实验

3．5本章小结

第四章姜黄素对携带ACE2的细胞外囊泡的作用

4．1材料与仪器

4．1．1材料

4．1．2仪器

4．1．3细胞系

4．2实验方法

4．2．1姜黄素的细胞毒性实验

4．2．2姜黄素对细胞外囊泡表征的影响研究

4．2．3姜黄素对EVs-ACE2相关蛋白表达量的影响

4．3结果与讨论

4．3．1姜黄素的细胞毒性实验

4．3．2姜黄素对细胞外囊泡表征的影响研究

4．4本章小结

全文总结

附录

参考文献

在学期间发表论文情况、参与课题与获奖情况

致谢