Abstract
实验材料
第一部分人垂体瘤转化基因的表达水平与垂体腺瘤侵袭性关系的研究及应用酵母双杂交系统筛选与其相互作用的蛋白质
前言
半定量RT-PCT检测hPTTG表达的实验示意图
酵母双杂交实验流程示意图
实验方法
一、人垂体瘤转化基因的表达水平与垂体腺瘤侵袭性关系的研究
二、应用酵母双杂交系统筛选与其相互作用的蛋白质
实验结果
一、RNA提取
二、环数-扫描强度曲线
三、PTTG基因和内对照CyclophilinA基因的PCR扩增
四、条带光密度值测定，计算PTTG/cyclophilin的比值
五、统计分析
六、反转录PCR扩增hPTTGcDNA的全长编码序列
七、pGEM-T-hPTTG重组质粒的构建和鉴定结果:
八、GBKT7-hPTTG诱饵蛋白重组质粒的构建和鉴定结果:
九、酵母宿主菌的表型验证
十、pGBKT7-hPTTG自激活和毒性的鉴定结果
十一、垂体腺瘤组织MATCHMAKER LIBRARY的构建
十二、将双链cDNA、pGBKT7-hPTTG诱饵蛋白质粒、pGADT7-Rec共转化酵母感受态AH109
十三、阳性克隆再鉴定结果
十四、酵母质粒的提取和阳性克隆插入片段的PCR扩增鉴定
十六、假阳性克隆的进一步排除
十七、阳性克隆DNA序列测定结果和同源性比较
讨论
本部分小结：
参考文献
第二部分垂体腺瘤组织和瘤周垂体组织基因系列表达文库的构建和初步分析
前言
实验方法示意图
实验方法
实验结果
一、总RNA质量鉴定和含量测定
二、双链cDNA合成
三、锚定酶切
四、接头连接
五、标签酶切
六、PCR扩增100bp双标签
七、标签酶切释放出26bp双标签
八、串联体的形成
九、串联体的克隆和阳性克隆鉴定
十、SAGE文库包含标签数的估算及初步的克隆测序及数据比较结果
十一、SAGE软件分析
讨论
本部分小结：
参考文献
文献综述 基因表达连续分析方法的原理和应用
英、汉名词对照
附图
致谢
个人简历
