引导选择抗细胞表面分子单链抗体

刘俊霞; 孟磊; 许静; 贾海蓉; 宋增璇

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目的用引导选择方法从抗KGla细胞的噬菌体展示抗体库中分离单链抗体.方法首先用KGla细胞吸附法富集抗体库3轮或未富集,再分别用抗CD34单克隆抗体为引导分子进行引导选择,分离单克隆后用免疫荧光和流式细胞术鉴别其细胞结合特异性.酶联免疫吸附法分析部分克隆与CD34抗原的结合,并对10个阳性克隆进行DNA序列分析.用一级结构不同的单链抗体作免疫印迹,鉴别其抗原分子量.结果从144个经3轮富集和引导选择的单菌落中挑选出100个阳性单克隆,从96个未经富集的文库中引导选择出2个阳性克隆.102个阳性克隆中47个可识别KGla、HL60、U937、和CEM细胞(KGla+、HL60+、U937+、CEM+),55个只识别KGla细胞(KGla+、HL60-、U937-、CEM-).其中28个只识别KGla细胞的单克隆经ELISA检测均不结合CD34抗原.10个阳性克隆的DNA序列分析显示来自4种不同克隆,所结合的抗原显示不同的分子量.结论从抗KGla单链抗体库分出102个能识别造血干细胞和祖细胞的阳性克隆,引导选择在改进筛选效率方面具有优越性.

著录项

来源
《中国医学科学院学报》 |2004年第4期|405-409|共5页
作者
刘俊霞; 孟磊; 许静; 贾海蓉; 宋增璇;
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作者单位

中国医学科学院,中国协和医科大学,血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津,300020;

中国医学科学院,中国协和医科大学,血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津,300020;

中国医学科学院,中国协和医科大学,血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津,300020;

中国医学科学院,中国协和医科大学,血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津,300020;

中国医学科学院,中国协和医科大学,血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津,300020;

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正文语种 chi
中图分类免疫分子生物学（免疫化学）;
关键词
引导选择; 噬菌体展示库; 单链抗体;

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