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抗重金属Cd2+单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定

         

摘要

旨在制备抗Cd2+高效价、敏感、特异的单克隆抗体(Cd2+ mAb).用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合Cd2+合成Cd-ITCBE半抗原、异硫氰酯法制备免疫抗原Cd-ITCBE-BSA和包被抗原Cd-ITCBE-OVA,紫外分光光度法(UV)、SDS-PAGE和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)进行鉴定;用Cd-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠细胞融合技术建立抗Cd2+的单克隆抗体(Cd2+ mAb)杂交瘤细胞株、体内诱生腹水法制备Cd2+ mAb并鉴定其免疫学特性.结果表明,人工抗原偶联成功,Cd-ITCBE-BSA和Cd-ITCBE-OVA中载体蛋白与Cd2+的质量浓度分别为7.1 g/L、191.7 mg/L和6.7 g/L、130.1 mg/L;筛选出1A3、2B7、2E10、4F3 4株杂交瘤细胞,其中2E10株间接ELISA效价细胞培养上清为1∶ (1.28×103),腹水为1∶(5.12×105),同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为7.58×108 L/moL,对Cd2+的半数抑制质量浓度(IC50)为16.3 μg/L,与Hg2+的交叉反应率(CR%)为18.6%,与其他化合物无交叉反应.

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