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棉花抗黄萎病相关基因筛选与亚克隆文库构建

         

摘要

以黄萎病菌诱导下差异表达的棉花抗病相关基因片段PR8为探针,利用杂交方法,对优质、抗病海岛棉品种Pima90-53 BAC文库进行筛选.从30 336个BAC克隆中筛选到含有PR8基因片段的4个阳性克隆,分别为127K13,128D14,169J3和178C5.用Sau3AI对其中的169J3克隆进行酶切,回收2 ~4 kb的DNA片段并连接到载体pUC118BamHI-BAP上,构建了含有该基因片段的亚克隆文库,共含有4 224个克隆.经电泳检测,插入片段在1~3 kb,平均为2 kb.该亚克隆文库的构建为克隆PR8基因奠定了基础.

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