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棉花肉桂醇脱氢酶基因的克隆与分析

         

摘要

肉桂醇脱氢酶(CAD)是木质素生物合成过程中的一个关键酶类.根据棉花纤维特异表达cDNA文库分析得到的肉桂醇脱氢酶基因EST序列设计引物,采用RT-PCR技术从棉花中克隆了一个CAD基因,命名为GhCAD5(GenBank 登录号为FJ848868).研究结果表明:GhCAD5全长1 488 bp,具有一个1 068 bp的开放阅读框,5′非编码区为140 bp,3′非编码区为280 bp,编码355个氨基酸,预测分子量约为38.403 kDa,等电点为7.67.氨基酸同源性分析发现,GhCAD5与拟南芥AtCAD1和水稻OsCAD4的同源性较高.利用PCR方法克隆了GhCAD5基因的基因组序列,长度为1 695 bp,包含6个外显子和5个内含子.将GhCAD5的ORF连接于原核表达载体pET-28a中,经IPTG诱导,获得了相应蛋白的表达.棉花GhCAD5基因的克隆为进一步研究其生物学功能和应用奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《华北农学报》 |2010年第2期|23-29|共7页
  • 作者单位

    新疆农业科学院;

    核技术生物技术研究所;

    新疆;

    乌鲁木齐;

    830091;

    新疆农业科学院;

    核技术生物技术研究所;

    新疆;

    乌鲁木齐;

    830091;

    新疆农业科学院;

    核技术生物技术研究所;

    新疆;

    乌鲁木齐;

    830091;

    新疆农业科学院;

    核技术生物技术研究所;

    新疆;

    乌鲁木齐;

    830091;

    新疆农业科学院;

    核技术生物技术研究所;

    新疆;

    乌鲁木齐;

    830091;

    新疆农业科学院;

    核技术生物技术研究所;

    新疆;

    乌鲁木齐;

    830091;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 转化及克隆;
  • 关键词

    棉花; 肉桂醇脱氢酶; 基因克隆; 原核表达;

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