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利用HPLC法检测活性肽HMG-CoA还原酶抑制剂活性

         

摘要

通过检测反应体系中NADPH的浓度变化,建立了一套测定HMG-CoA还原酶抑制剂活性的HPLC法.以Symmetry(R)C18色谱柱(5μm,4.6 mm ×250 mm)进行分离,流动相为:V(K2HPO4-KH2PO4)∶V(甲醇)=85∶15,pH7.2,流速1 mL· min-1;检测波长337 nm,进样量20 μL,柱温25℃.在此条件下,NADPH的线性范围为0.6 ~ 600 μmol· L-1,加标回收率为94.48% ~ 101.81%,相对标准偏差(n=5)小于4.49%,最低检出限为0.01 μmol ·L-1.用此方法对蚕蛹蛋白肽的HMG-CoA还原酶抑制剂活性进行了测定,在酶解肽浓度为0.5mg· mL-时,其抑制率为28.70%.

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