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马铃薯X病毒25 kD运动蛋白基因和外壳蛋白基因介导的抗病性研究

         

摘要

以马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)的RNA为模板,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分别扩增出长度为681 bp的非翻译马铃薯X病毒25 kD运动蛋白基因(PVX-p25)和长度为714 bp的非翻译马铃薯X病毒外壳蛋白基因(PVX-CP).并分别构建植物表达载体pROKⅡ-p25和pROKⅡ-CP.利用农杆菌介导方法转化烟草NC89.经卡那霉素筛选、PCR检测,共获得转非翻译PVX-p25的转基因植株78株,转非翻译PVX-CP的转基因植株83株.抗病性试验表明,转非翻译PVX-p25的78株中有31株对PVX的侵染表现高度抗病,抗性比例为39.7%;转非翻译PVX-CP的83株中有11株对PVX的侵染表现高度抗病,抗性比例为13.3%.分子生物学检测和抗病性分析表明,抗病性均为RNA介导的病毒抗性.研究结果初步证明,转非翻译PVX-p25可以更有效地获得抗PVX转基因植株.

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