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橡胶树延伸因子cDNA及其5′端启动子区域序列的分离与分析

         

摘要

橡胶延伸因子REF(Rubber Elongation Factor)是橡胶生物合成中最重要的酶之一, 是胶乳中主要的蛋白质. 作者利用已发表的REF cDNA序列设计并合成引物. 通过提取胶乳总RNA用RT法合成cDNA后, 通过PCR技术扩增并克隆了REF cDNA序列. 序列测定结果表明, 所克隆的REF cDNA编码区序列全长414个碱基, 编码138个氨基酸, 3′端非编码区长112 bp. 与Goyvaerts E等人发表的序列比较: REF cDNA编码区序列同源率为100%, 3′端非编码区有2 bp的差异, 同源率为98%. 在此基础上, 通过步移法分离5′端启动子区域260 bp的序列, 其中, 含典型的TATA盒和CAAT盒. 为证实该基因为乳管特异表达, 我们通过Northern blot 对橡胶延伸因子基因在胶乳和叶片中的表达做分析. 初步结果表明, 橡胶延伸因子基因主要在胶乳中表达.

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