鲤鱼生长激素和对虾白斑病毒囊膜蛋白VP28的融合表达及功能研究

韩建山; 龙燕; 孟小林; 徐进平; 鲁伟; 王健

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鲤鱼生长激素和对虾白斑病毒囊膜蛋白VP28的融合表达及功能研究

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鲤鱼生长激素GH是鲤鱼生长腺体分泌并促进鲤鱼生长的一种分泌蛋白.对虾白斑综合病毒(WSSV)VP28蛋白为囊膜蛋白,是病毒感染宿主的必需因子.根据gh和vp28的上下游序列,分别设计合成两对引物,PCR扩增gh和vp28基因,将基因gh和vp28按先后次序融合后插入穿梭质粒pPIC6αC多克隆位点,构建成重组分泌表达穿梭质粒pPIC6αC-(gh+vp28),用Bstx1单酶切穿梭质粒pPIC6αC-(gh+vp28)线形化,转化毕赤酵母X-33.重组菌株30℃甲醇诱导,实现在酵母中的融合分泌表达,获得融合蛋白.表达产物经SDS-PAGE检测和Western Blot印迹鉴定,显示与预期大小66kD相吻合的融合蛋白带.用Ni2+-柱纯化后的基因工程蛋白注射鳌虾进行蛋白生物功能测试,结果表明该蛋白获得了促鳌虾生长和抗WSSV感染的双重功效.

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来源
《水生生物学报》 |2008年第3期|308-313|共6页
作者
韩建山; 龙燕; 孟小林; 徐进平; 鲁伟; 王健;
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作者单位

武汉大学病毒学国家重点实验室,武汉 430072;

武汉大学病毒学国家重点实验室,武汉 430072;

武汉大学病毒学国家重点实验室,武汉 430072;

武汉大学病毒学国家重点实验室,武汉 430072;

武汉大学病毒学国家重点实验室,武汉 430072;

武汉大学病毒学国家重点实验室,武汉 430072;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类蛋白质代谢;
关键词
鲤鱼生长激素(GH); 对虾白斑综合病毒(WSSV)VP28; gh+vp28; 毕赤酵母; 促生长; 抗病毒;

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