构建抑制NF-кB信号通路的药物筛选模型

张立鹏; 李成海; 刘明耀; 罗剑

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构建抑制NF-кB信号通路的药物筛选模型

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NF-кB已被证明在肿瘤和炎症过程中起到至关重要的作用.因此,建立抑制NF-кB信号通路的药物筛选模型至关重要.利用荧光素酶报告基因技术与蛋白印迹技术分别探索TNFα处理浓度及时间对NF-кB报告基因表达和NF-кB抑制亚单位IкBα降解的影响,进而构建NF-кB信号通路抑制剂药物筛选模型.实验结果表明,0.01 nmol/L TNFα作用24 h即能刺激HEK293T细胞中NF-кB报告基因较高水平的表达,且其表达量与TNFα的剂量和处理时间呈正相关性;0.01 nmol/L TNFα作用5 min即能使Pane-28细胞中IкBα明显降解,20min～30 min几乎降解完全,之后IKBa含量又开始增加.NF-кB阳性抑制剂藤黄酸验证表明NF-кB萤光素酶报告基因检测筛选体系和NF-кB抑制亚单位降解筛选体系两种体系稳定可行.结果证明,两种模型可以用于NF-кB信号通路抑制剂药物的筛选.

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来源
《激光生物学报》 |2010年第5期|580-586|共7页
作者
张立鹏; 李成海; 刘明耀; 罗剑;
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作者单位

华东师范大学生命科学学院生命医学研究所,上海,200241;

华东师范大学生命科学学院生命医学研究所,上海,200241;

华东师范大学生命科学学院生命医学研究所,上海,200241;

华东师范大学生命科学学院生命医学研究所,上海,200241;

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正文语种 chi
中图分类 Q291R915;
关键词
NF-кB; 药物筛选模型; TNFα; IкBα; 藤磺酸;

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