禽致病性大肠杆菌安徽分离株luxS和pfs基因的克隆、表达与细胞外合成AI-2活性检测

韩先干; 白灏; 刘蕾; 陈文静; 丁铲; 胡青海; 祁克宗; 于圣青

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【目的】LuxS/AI-2型密度感应系统存在于革兰氏阴性和阳性菌中,可产生用于细菌种间交流的通用自诱导信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2),细菌许多生理功能都受此系统的调节。本研究开展对禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic Escherichia coli,APEC)自诱导信号分子AI-2的检测和建立体外合成、定量的方法,为进一步研究APEC的AI-2调控作用奠定基础。【方法】利用哈维弧菌BB170(Vibrio harveyi BB170)开展对APEC AI-2的检测;利用表达、纯化的LuxS和Pfs在体外催化S-腺苷同型半胱氨酸(Sadenosylhomocysteine,SAH),进行AI-2的体外合成。【结果】APEC能产生自诱导信号分子AI-2;成功表达可用于AI-2合成的可溶性重组蛋白LuxS和Pfs;纯化的重组蛋白LuxS和Pfs与SAH同时作用后,合成了浓度为300μmol/L的AI-2;运用哈维弧菌BB170对合成的AI-2活性检测表明,其活性是阴性对照的700倍。【结论】APEC存在LuxS/AI-2型密度感应系统,APEC的LuxS和Pfs可以在体外催化SAH生成有活性的AI-2分子。本研究为进一步研究APEC的AI-2的调控作用奠定基础。

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来源
《微生物学报》 |2012年第9期|1167-1172|共6页
作者
韩先干; 白灏; 刘蕾; 陈文静; 丁铲; 胡青海; 祁克宗; 于圣青;
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作者单位

中国农业科学院上海兽医研究所;

上海200241;

安徽农业大学动物科技学院;

合肥230036;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病原细菌;
关键词
禽致病性大肠杆菌; 密度感应系统; 信号分子AI-2; LuxS;

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