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空肠弯曲菌脉冲场凝胶电泳分子检测方法的建立及应用

         

摘要

【目的】建立空肠弯曲菌脉冲场电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)图谱分型方法。【方法】在PFGE基本程序基础上,通过调整菌液浓度、Seakem Gold琼脂糖凝胶浓度、蛋白酶K浓度、洗涤方式和限制性内切酶SmaⅠ浓度,进行程序的比较与优化。应用PFGE技术对不同来源分离株进行分析。【结果】37株空肠弯曲菌脉冲场凝胶电泳图谱显示分离株均产生了6~24条电泳带,条带数量适中,清晰易读;系统进化树显示,可分为4个遗传谱系,分离株主要分布于PFGE遗传谱系Ⅳ,不同源分离株在各组群中呈交叉分布。【结论】PFGE对空肠弯曲菌具有很强的分型能力和良好的溯源性,初步数据显示鸡、牛等动物源空肠弯曲菌与腹泻病人空肠弯曲菌病密切相关。

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