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YXXM基序对J亚群禽白血病病毒复制的影响

         

摘要

【目的】毒株NX0101是骨髓瘤病变型J亚群禽白血病病毒,其早期感染细胞能诱导PI3K/Akt信号转导通路的激活,本文针对NX0101毒株是否存在YXXM基序及其作用进行了探讨。【方法】利用TMpred软件对NX0101毒株囊膜蛋白(Env)的氨基酸序列进行生物信息学分析,通过搭桥PCR方法将YXXM基序相应的核苷酸序列突变后,构建突变质粒并转染DF-1细胞,拯救出YXXM突变体毒株NX0101mt(Y/F,M/A),利用real-time PCR和ELISA方法检测并比较YXXM突变前后毒株在RNA水平和蛋白水平的复制情况。【结果】NX0101毒株Env胞浆区554-557位氨基酸存在典型的PI3K结合基序YXXM。YXXM基序突变后,病毒RNA转录水平和病毒蛋白合成水平都显著下降。【结论】YXXM基序对NX0101毒株在体外宿主细胞中复制发挥重要的作用。

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