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苏云金芽孢杆菌的cry2A芽孢期启动子和分子伴侣ORF1-ORF2对Cry11Aa蛋白表达的影响

         
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摘要

[目的]分析苏云金芽孢杆菌的cry2A型芽孢期启动子对晶体蛋白Cry11Aa的协调作用和分子伴侣ORF1-ORF2对Cry11Aa表达的促进功能.[方法]3个包括cry11Aa编码区的重组质粒pHcy1、pHcy2和pHcy4被构建并电激转化到苏云金芽孢杆菌晶体缺陷株4Q7中,其中pHcy1质粒携带cry11Aa基因自身启动子和分子伴侣p19基因,pHcy2携带cry2A型芽孢期启动子和分子伴侣orf1-orf2基因,pHcy4质粒在pHcy1的上游插入了cry2A型芽孢期启动子和分子伴侣orf1-orf2基因.SDS-PAGE分析了Cry11Aa蛋白在各重组苏云金菌株中的表达情况,并通过生物测定确定了其对蚊虫的生物活性.[结果]SDS-PAGE结果表明,Cry11Aa蛋白在4Q7(pHcy1)和4QT(pHcy4)均获得了表达,在4Q7(pHcy2)中未检测到Cry11Aa蛋白,推测晶体蛋白Cry11A不能利用cry2A型启动子进行表达调控;Cry11Aa蛋白在等体积4Q7(pHcy4)培养液中的表达量是4Q7(pHcy1)菌株的1.25倍,暗示着分子伴侣ORF1-ORF2在某种程度上能提高Cry11Aa的蛋白表达量.4Q7(pHcy1)和4Q7(pHcy4)形成的Cry11Aa蛋白晶体的形状和大小相似,两者对致倦库蚊的生物活性没有明显差异,LC50s分别为59.33 ng/mL和66.21 ng/mL,.[结论]推测晶体蛋白Cry11A能否成功表达与其使用启动子的类型和两者的协调配合有关.分子伴侣ORF1-ORF2虽然在某种程度上能提高Cry11Aa的蛋白表达量,但对提高Cry11Aa蛋白的杀蚊毒力没有显著性帮助.

著录项

  • 来源
    《微生物学报》 |2008年第5期|672-676|共5页
  • 作者

    师永霞; 曾少灵; 袁美妗; 孙钒; 庞义;

  • 作者单位

    中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广州,510275;

    广东检验检疫技术中心卫生检疫实验室,广州,510700;

    中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广州,510275;

    深圳出入境检验检疫局动植中心,深圳,518010;

    中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广州,510275;

    中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广州,510275;

    中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广州,510275;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因的表达;
  • 关键词

    苏云金芽孢杆菌; 分子伴侣; p19基因; orf1-orf2基因; 晶体蛋白Cry11Aa;

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