Qβ RNA 复制酶中亚基的共表达对β亚基溶解性的影响

王栋

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Qβ RNA 复制酶中亚基的共表达对β亚基溶解性的影响

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在体外RNA和蛋白质合成及自复制系统的研究中,Qβ RNA复制酶作为以RNA为模板的RNA聚合酶,是比较重要的应用酶种之一.该酶由4个亚基组成,其中只有β亚基是由病毒基因编码,而其他3个亚基都是宿主蛋白.利用普通表达载体合成Qβ复制酶时,得到的β亚基几乎都是不溶性蛋白,从而影响了Qβ复制酶的活性和产率.为尝试提高β亚基的溶解性,构建含有β亚基基因的表达质粒pBAD 33-rep,同时利用pET21a(+)为表达载体表达其他3个亚基进行共表达研究.不同亚基组合的共表达结果通过SDS-PAGE分析表明,当β亚基与EF-Tu-Ts亚基共表达时,溶解度有一定的提高,而且可溶性部分也具有复制酶活性.通过调节共表达诱导物浓度,相对增强可溶性β亚基的表达,可溶性Qβ复制酶酶量得到相应的提高.

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来源
《微生物学报》 |2004年第6期|780-784|共5页
作者
王栋;
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作者单位

江南大学生物工程学院,工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214036;

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正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
Qβ复制酶; 共表达; β亚基; 溶解性;

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