圈卷产色链霉菌硝基烷类氧化酶的分离纯化及酶学性质

张集慧; 马文勃; 谭华荣

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圈卷产色链霉菌硝基烷类氧化酶的分离纯化及酶学性质

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圈卷产色链霉菌硝基烷类氧化酶基因naoA在大肠杆菌中获得了成功表达,从含有重组质粒pNA101(pET23b∷naoA)的工程菌株BL21(DE3)中分离纯化了硝基烷类氧化酶,SDS-PAGE检测为均一.对纯酶进行了酶学性质及动力学研究.底物为1-硝基丙烷、2-硝基丙烷和硝基乙烷时,在0.4mol/L的磷酸缓冲液中,酶的最适反应pH值为7～8,最适反应温度为48℃～56℃.室温保存6d后,酶的活性保持了43.3%,但对60℃以上的高温敏感.硫醇化合物如巯基乙醇、还原型谷胱甘肽不同程度地抑制酶活性,特别是NADH,其浓度为1mmol/L时,酶活性几乎全部丧失.以1-硝基丙烷为底物时,NaoA的Km为35.7mmol/L,Vmax为0.199μmol/(μg.min).

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来源
《微生物学报》 |2002年第5期|587-593|共7页
作者
张集慧; 马文勃; 谭华荣;
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作者单位

中国科学院微生物研究所,北京,100080;

中国科学院微生物研究所,北京,100080;

中国科学院微生物研究所,北京,100080;

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正文语种 chi
中图分类发生遗传学（发育遗传学）、生理遗传学;
关键词
圈卷产色链霉菌; 硝基烷类氧化酶; 纯化; 酶学性质;

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