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复方苦参注射液通过增强细胞免疫杀伤作用诱导宫颈癌海拉细胞凋亡

         

摘要

目的探讨复方苦参注射液对人宫颈癌海拉细胞凋亡及人白细胞抗原G(HLA-G)基因表达的影响。方法2018年7月至2019年8月,体外培养人宫颈癌海拉细胞,用0、100、200、500 mL/L复方苦参注射液分别干预海拉细胞48 h。采用人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)法和平板克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况,蛋白质印迹法检测细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化胱天蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)蛋白水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液中转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-4(IL-4)含量,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法检测细胞中HLA-G表达水平。结果与0 mL/L复方苦参注射液干预组相比,经100、200、500 mL/L复方苦参注射液干预的海拉细胞增殖能力明显减弱,G_(0)/G_(1)期细胞比例明显增多,S期细胞比例明显减少,细胞凋亡率[(6.02±0.35)%比(14.38±1.06)%、(20.62±1.57)%、(31.84±2.11)%]升高,Bax和cleaved-caspase-3蛋白水平明显上调,Bcl-2蛋白水平明显下调,细胞上清液中TGF-β1和IL-4含量明显降低,TNF-α含量明显升高,HLA-G mRNA和蛋白表达下降,且其作用具有剂量依赖关系(P<0.05)。结论复方苦参注射液能够诱导人宫颈癌海拉细胞凋亡,其作用机制可能与抑制HLA-G基因的表达来增强细胞免疫杀伤作用有关。

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