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长链非编码RNA LINC00662靶向微小RNA-103a-3p对黑色素瘤细胞增殖和周期的影响

         

摘要

目的探究长链非编码RNA LINC00662对黑色素瘤细胞增殖和周期的影响,以及分子机制。方法本研究于2018年10月至2020年2月进行。以体外培养的人皮肤黑色素瘤细胞A375为研究对象,然后将其分为四组,分别为si-NC、siLINC00662、si-LINC00662+anti-miR-NC和si-LINC00662+anti-miR-103a-3p转染A375细胞。采用RT-PCR检测皮肤黑色素瘤组织中LINC00662和miR-103a-3p的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,蛋白质印迹法(western blot‐ting)检测细胞周期蛋白1(CyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达。结果与正常组织和正常皮肤细胞相比,在皮肤黑色素瘤组织和细胞株中LINC00662表达[1.24±0.50比4.17±1.27]上调,miR-103a-3p表达[1.17±0.32比0.64±0.21]显著下调。LINC00662与miR-103a-3p靶向结合。与si-NC组相比,si-LINC00662组LINC00662表达[1.00±0.06比0.48±0.06]、OD值和S期细胞比例[(34.7±3.5)%比(20.5±3.0)%]降低,G0/G1期细胞比例[(57.4±5.2)%比(74.7±4.8)%]增高,Cyclin D1[1.00±0.01比0.56±0.06]、PCNA蛋白表达[0.99±0.05比0.53±0.06]下降。抑制miR-103a-3p表达可以部分恢复沉默LINC00662对黑色素瘤的细胞增殖、周期的影响。结论长链非编码RNA LINC00662通过靶向负调控miR-103a-3p的表达,抑制皮肤黑色素瘤细胞的增殖,并诱导细胞周期阻滞。

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