人重组腺病毒rAd-IL-23R的构建与功能鉴定

苑晓梅; 刘力

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人重组腺病毒rAd-IL-23R的构建与功能鉴定

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cqvip:目的构建表达白介素23受体的人重组腺病毒(rAd-IL-23R),并探究该病毒对人子宫颈癌(HeLa)细胞系增殖的影响。方法采用AdEasyTM系统,将带有IL-23R的穿梭载体与腺病毒骨架载体进行同源重组,构建pAd-IL-23R,酶切消化鉴定,线性化的病毒质粒在HEK-293A细胞中进行病毒包装和扩增,TCID50法测定病毒滴度。CCK-8法检测rAd-IL-23R对HeLa细胞增殖的影响,流式细胞计量术分析和Western blot检测rAd-IL-23R对HeLa细胞凋亡的影响。结果pAd-IL-23R经PacⅠ酶切消化为约30 kb和3 kb的核酸片段,可诱导HEK-293A细胞产生细胞病变,并成功表达IL-23R蛋白;用不同滴度的rAd-IL-23R(0、1和2 MOI)感染HeLa细胞后,rAd-IL-23R对细胞增殖的抑制具有明显的剂量效应(P<0.05),随着MOI增加,细胞凋亡率显著增加(P<0.05),同时cleaved-caspase 3的蛋白表达水平增高。结论成功构建rAd-IL-23R,该重组腺病毒可抑制HeLa细胞增殖并促进凋亡发生。

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来源
《基础医学与临床》 |2020年第5期|662-667|共6页
作者
苑晓梅; 刘力;
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作者单位

中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病原生物学系北京100005;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）;
关键词
重组腺病毒; IL-23R; 宫颈癌; 增殖; 凋亡;

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