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微菌落法快速检测与鉴定啤酒腐败乳酸

         

摘要

本文研究了一种检测与鉴定啤酒腐败乳酸菌(LAB)的微菌落法.在该方法中,细菌细胞经聚碳酸酯膜过滤处理后,置于对啤酒腐败乳酸菌具有高度特异检测能力的ABD培养基中,经短期培养后,由活细胞形成的微菌落用羧基二乙酸荧光染色,利用μFinder检测系统计数.本实验首先用传统培养法研究了各种啤酒腐败乳酸菌的生长状况,其中将Lactobacillus lindneri及某些L. paracollinoides视为生长缓慢菌;利用它们来评估微菌落法的检测速度.结果发现所有的生长缓慢菌都能在3天内检出.此法具有高度特异性,甚至能区分乳酸菌内各种菌群对啤酒致腐能力的差别.以上结果表明,微菌落法能利用费用低廉的羧基二乙酸(CFDA)荧光染色法快速而准确地检测啤酒腐败乳酸菌.为了进一步确定被测菌的种群特征,用物种特异性荧光原位杂交(FISH)探针对经CFDA检测的微菌落在种内水平进行有效区分.在CFDA染色和FISH中没有出现因杂音信号引起的假阳性结果.综上所述,本实验证明了微菌落法不逊色于传统培养法,是一种针对啤酒腐败乳酸菌的快速而特异性强的手段.

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