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小鼠TIE2基因启动子的克隆及转录活性分析

         

摘要

克隆小鼠TIE2基因的启动子并分析其转录活性.设计并合成引物,以小鼠肝脏组织DNA为模板,巢式PCR扩增小鼠TIE2基因启动子区.将扩增获得的系列截短片段克隆入荧光素酶(Luc)报告基因表达载体pGL3-Basic中,构建系列启动子区转录活性报告质粒pGL3-TIE2-Luc.报告质粒与内参质粒共转染SVEC4-10、NIH3T3、HUVEC及NIT-1细胞系,48h后收获细胞检测双荧光素酶的表达情况.构建的pGL3-TIE2-Luc系列报告质粒经过酶切鉴定及DNA测序分析都显示正确;转染4种细胞系后进行双荧光素酶活性检测的结果表明,TIE2基因启动子区域(-2056-+1)具有较强的转录活性.成功构建小鼠TIE2基因启动子报告质粒,证实TIE2基因上游区域(-2056-+1)具有较强的启动子活性.

著录项

  • 来源
    《生物技术通报》 |2012年第11期|90-94|共5页
  • 作者单位

    广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室,南宁530021;

    广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室,南宁530021;

    广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室,南宁530021;

    广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室,南宁530021;

    广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室,南宁530021;

    广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室,南宁530021;

    广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室,南宁530021;

    广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室,南宁530021;

    广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室,南宁530021;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    TIE2; 启动子; 双荧光素酶活性检测;

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