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大鼠D-双功能蛋白基因原核表达载体的构建及表达

         

摘要

利用原核表达系统构建大鼠D-双功能蛋白表达栽体.设计基因拼接引物,通过RT-PCR合成DBP基因cDNA序列,将酶切、纯化的DBP基因与经相同处理的表达栽体pET-28a相连接,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性重组子.将通过酶切及序列分析鉴定阳性的重组子质粒转入感受态大肠杆菌BL21-gold表达菌中,经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE分析目的蛋白表达情况.结果显示,成功获得了包含DBP基因的双链cDNA序列,酶切、序列分析及Western blotting证实成功构建了DBP基因的原核表达载体.通过原核表达系统,DBP蛋白以包涵体形式产生,复性后可获得高表达的目的蛋白.

著录项

  • 来源
    《生物技术通报》 |2011年第1期|139-142152|共5页
  • 作者单位

    河北医科大学生化教研室,石家庄市河东社区卫生服务中心,石家庄050017;

    河北医科大学生化教研室,石家庄市河东社区卫生服务中心,石家庄050017;

    河北医科大学生化教研室,石家庄市河东社区卫生服务中心,石家庄050017;

    河北医科大学生化教研室,石家庄市河东社区卫生服务中心,石家庄050017;

    河北医科大学生化教研室,石家庄市河东社区卫生服务中心,石家庄050017;

    河北医科大学生化教研室,石家庄市河东社区卫生服务中心,石家庄050017;

    河北医科大学生化教研室,石家庄市河东社区卫生服务中心,石家庄050017;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    D-双功能蛋白; 原核表达; 包涵体; 大鼠;

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