抗菌肽牛乳铁蛋白肽衍生肽在毕赤酵母中的表达及活性鉴定

李忠清; 王亮

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抗菌肽牛乳铁蛋白肽衍生肽在毕赤酵母中的表达及活性鉴定

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利用巴斯德毕赤酵母系统表达抗菌肽牛乳铁蛋白肽衍生肽简称LfcinBD,获得的表达产物具有较强的抗菌活性.将人工设计的用化学合成法合成的以酵母偏爱密码子编码的LfcinBD基因片段克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得的重组质粒pPIC9K-LfcinBD通过限制性内切酶Sac Ⅰ酶切线性化,电击法转化毕赤酵母GS115宿主菌,G418抗性筛选,得到高拷贝转化子.经PCR检测,LfcinBD基因与毕赤酵母染色体稳定整合.阳性克隆经甲醇诱导表达LfcinBD,诱导表达5 d,每24 h取上清1 mL,进行抑菌试验.结果表明,抗菌肽牛乳铁多肽衍生肽基因已整合到酵母细胞基因组中并获得表达,经0.5%甲醇在30℃诱导48 h可产生较强抗菌活性的抗菌肽,而且对氨苄青霉素抗性的大肠杆菌亦有较强的抑菌作用.

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来源
《生物技术通报》 |2011年第6期|145-149|共5页
作者
李忠清; 王亮;
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作者单位

中国科学院新疆分院理化技术研究所,乌鲁木齐,830011;

新疆金牛生物有限公司,乌鲁木齐,830026;

中国科学院研究生院,北京,100039;

中国科学院新疆分院理化技术研究所,乌鲁木齐,830011;

中国科学院研究生院,北京,100039;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
牛乳铁蛋白肽衍生肽(LfcinBD); 毕赤酵母表达系统; 抗菌活性;

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