林麝干扰素α基因克隆、表达及转录调控分析

杨威; 伍茜; 程建国; 罗燕; 王印; 杨泽晓; 姚学萍

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林麝干扰素α基因克隆、表达及转录调控分析

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干扰素在病毒性疾病的防治上,具有很高的临床应用前景。为了林麝干扰素的研究与应用,使用同源克隆方法首次克隆得到9条林麝干扰素α基因序列,序列全长均为570 bp,编码189个氨基酸,前23个氨基酸为信号肽,具有4个保守的半胱氨酸残基和5个保守的脯氨酸残基。9种亚型之间,核酸序列同源性为97.0%-99.6%,氨基酸序列同源性为93.7%-99.5%。蛋白结构主要由5个α-螺旋和无规则卷曲构成,三级结构与牛和人干扰素α高度相似。结构域预测包含干扰素受体IFNAR结合位点。首次构建了林麝干扰素α表达质粒并成功使用毕赤酵母表达出林麝干扰素α,确定了1%的最佳甲醇诱导浓度与96 h的最佳诱导时间。使用qPCR首次确定了林麝干扰素α对林麝肺成纤维细胞FMD-C1干扰素刺激基因具有转录调控作用,并具有剂量依赖性,调控作用在6 h达到最强。CCK-8法确定了林麝干扰素α可以抑制FMD-C1细胞的增殖,抗增殖作用也具有剂量依赖性。以上结果为林麝干扰素α的抗病毒研究与临床应用提供了理论基础。

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来源
《生物技术通报》 |2022年第1期|194-204|共11页
作者
杨威; 伍茜; 程建国; 罗燕; 王印; 杨泽晓; 姚学萍;
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作者单位

四川农业大学动物医学院;

四川养麝研究所;

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正文语种 chi
中图分类传染病;
关键词
林麝; 干扰素; 毕赤酵母; 转录调控;

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