林麝IL-1β基因的克隆、表达及生物学活性检测

邹丹丹; 杨东; 姜立春; 邹方东

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林麝IL-1β基因的克隆、表达及生物学活性检测

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旨在克隆和表达林麝IL-1β,为其用于林麝疾病的防治奠定基础.从林麝外周血单核细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增IL-1β(Interleukin-1β)基因.将IL-1β成熟肽编码序列连接到pET32a(+)原核表达载体进行表达,纯化目的蛋白并检测其生物学活性.序列分析表明,林麝IL-1β开放阅读框(ORF)长801 bp,编码266个氨基酸,且在反刍动物中高度保守.IPTG诱导林麝IL-1β融合蛋白(MB-rIL-1β)表达,得到约35 ku的目标带,且大部分以可溶形式存在.对上清蛋白分离纯化得到约35 ku的单一条带.细胞增殖试验结果显示,林麝IL-1β融合蛋白能明显促进小鼠成纤维细胞(L929)增殖,表明其具有生物学活性.运用大肠杆菌表达系统可高效可溶性表达具有生物学活性的MB-rIL-1β融合蛋白.

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来源
《畜牧兽医学报》 |2013年第11期|1734-1738|共5页
作者
邹丹丹; 杨东; 姜立春; 邹方东;
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作者单位

四川大学生命科学学院,四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064;

四川大学生命科学学院,四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064;

四川大学生命科学学院,四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064;

四川大学生命科学学院,四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064;

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正文语种 chi
中图分类其他家畜;遗传;
关键词
林麝; IL-1β; 原核表达; 蛋白纯化; 活性检测;

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