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溴百里酚蓝与牛血清白蛋白的相互作用研究

         

摘要

在模拟动物体生理条件和不同温度下,用荧光光谱和紫外-可见吸收光谱法研究了溴百里酚蓝(BTB)与牛血清白蛋白(BSA)结合反应的光谱行为.用Stern-Volmer 和Lineweaver-Burk 方程分别处理试验数据,发现BSA 与BTB发生反应生成了新的复合物,属于静态荧光猝灭.求出了反应时复合物的形成常数K_(LB) (2.792×10~5L·mol~(-1))、热力学参数(ΔH~θ=﹣20.24 kJ·mol~(-1),ΔS~θ=37.22J·K~(-1),ΔG~θ=﹣31.25kJ·mol~(-1))与结合位点数(1.1578).根据Frster偶极-偶极非辐射能量转移理论计算出结合位置距离212位色氨酸残基2.60nm,证明二者主要靠静电作用力结合.同时用同步荧光光谱和三维荧光光谱法探讨了BTB对BSA 构象的影响,表明BTB使色氨酸残基所处微环境的极性减弱、疏水作用增强,为阐明BTB的染色机理、毒理效应和生物学效应提供重要信息.

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