简易荧光仪共振光散射光谱法测定蛋白质的研究

王林; 王照丽; 李树伟

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@@ 光散射是指一束光通过介质时,在入射光方向以外的各个方向观察到的一种光辐射现象. 瑞利散射是散射光波长等于入射光波长,而且散射粒子又远小于入射光波长产生的弹性散射 ,其散射强度与波长四次方成反比[1].如果这种瑞利散射位于吸收带附近,则可引起散射强度的急剧增加,这种现象被称为共振瑞利散射(RRS),或称共振光散射(RLS) [2].1993年,Pasternack等首次用共振光散射技术研究了卟啉类化合物在核酸上的聚集,从而首次将该技术与化学过程联系起来.黄承志等利用卟啉在蛋白质或核酸上聚合组装时产生的增强的共振光散射信号与生物大分子浓度间的线性关系,建立了共振光散射技术定量测定生物大分子的新的分析方法.寻找新的共振光散射探针,建立简便实用的蛋白质分析方法在实际工作中是极为重要的[3～5].本文实验了茜素红与蛋白质的结合反应.在pH=4.10的缓冲溶液中加入蛋白质后,茜素红溶液的共振光散射显著增强,共振光散射信号与蛋白质浓度有正比关系.本文首次将目前广泛使用的简易型荧光分光光度计用于共振光散射测定.通过实验,确定了以茜素红反应体系用于测定蛋白质的条件,建立了测定人血清试样中蛋白质含量的简单、价廉的方法.该方法的实验结果与经典的考马斯亮蓝法(CBBG-250)[6]的结果基本上一致,方法的灵敏度、选择性及稳定性都较理想.

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来源
《化学研究与应用》 |2001年第5期|591-593|共3页
作者
王林; 王照丽; 李树伟;
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作者单位

重庆渝西学院化学系,;

四川师范大学化学与生命科学学院,;

四川师范大学化学与生命科学学院,;

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正文语种 chi
中图分类光化学分析法（光谱分析法）;
关键词
蛋白质; 茜素红; 共振光散射光谱;

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