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对虾白斑综合症病毒双抗体夹心ELISA方法的建立

         

摘要

SPF BALB/c mice were immunized with purified VP28 protein of white spot syndrome virus (WSSV) emulsified with Fretmd's adjuvant. The spleen cell isolated from vaccinated mice were fused with SP2/0 cells. Two hybridoma of 2G9 and 3 E5, screened using ELISA, could secrete stably specific antibodies to VP28 protein of WSSV A double antibody sandwich ELISA (DAS-ELISA) for detection of WSSV was established based on monoclonal antibody (3E5) and rabbit-anti-VP28 polyclonal antibody. The result showed that the DAS-ELISA had good specificity and sensitivity, indicating that the method was suitable for rapid detection and epidemiological investigation of WSSV infection in shrimps.%用将纯化的对虾白斑综合症病毒VP28蛋白免疫BALB/c小鼠,分离免疫鼠脾细胞,与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选,得到了2株(2G9,3E5)可以稳定分泌抗对虾白斑综合症病毒特异性单抗的杂交瘤细胞株。用纯化的VP28蛋白免疫家兔,按常规方法制备多抗。选用单抗(3E5)包被ELISA板,用兔多抗作为捕获抗体,建立了对虾白斑综合症病毒的双抗体夹心ELISA检测方法。该方法具有良好的特异性和敏感性,为对虾白斑综合症病毒的检测提供了有效工具。

著录项

  • 来源
    《中国动物检疫》 |2012年第4期|41-43|共3页
  • 作者单位

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,广东深圳518045;

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,广东深圳518045;

    华中农业大学水产学院,湖北武汉430070;

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,广东深圳518045;

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,广东深圳518045;

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,广东深圳518045;

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,广东深圳518045;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 S945.46;
  • 关键词

    对虾白斑综合症病毒; VP28蛋白; 单克隆抗体; ELISA;

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