猪圆环病毒1型ORF2基因的改造及其在大肠杆菌中的表达

张福良; 孙利华; 宋长绪

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猪圆环病毒1型ORF2基因的改造及其在大肠杆菌中的表达

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根据GenBank中猪圆环病毒1型(PCV1)ORF2基因序列,设计合成了一对引物,对PCV1 ORF2基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF2基因(702bp)克隆入pMD18-T载体,筛选获得重组质粒命名为pMD-ORF2.由于ORF2前面有120多个信号肽和序列中有大量的稀有密码子,所以将ORF2进行改造并将改造的ORF2双酶切产物插入原核表达载体pET-32α与pET-41 α,得到重组子命名为pET-ORF2-1与pET-ORF2-2.用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明PCVI-ORF2在pET-32α和pET-41α中获得了高效融合表达,其表达蛋白分子量约为30 Kda和45Kda.

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来源
《中国动物检疫》 |2009年第6期|33-35|共3页
作者
张福良; 孙利华; 宋长绪;
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作者单位

安阳工学院生物与食品学院,河南安阳,455000;

广东省农业科院兽医研究所,广东广州,510640;

广东省农业科院兽医研究所,广东广州,510640;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 S852.659.6;
关键词
PCV1 ORF2; 克隆; 改造; 表达;

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