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猪伪狂犬病毒gE基因在大肠杆菌中的表达

         

摘要

根据Genebank中伪狂犬病毒Min-A株gE基因序列,设计了一对引物,PCR扩增长度为557bp的gE基因去信号肽后的主要抗原区域(157-714bp).将其克隆进测序栽体PGEM-Teasy中,成功构建质粒PGEMTeasy-gE.用BamhⅠ和HindⅢ将gE基因主要抗原区域从PGEM-Teasy中切出,然后与同样酶处理的原核表达载体PET32A连接.命名为PET-gE.在IPTG的诱导后,经SDS-PAGE电泳发现43ku处出现特异性蛋白条带.经过Western blot分析,表达产物具有很好的免疫原性.该研究成功表达出具有抗原性的目的蛋白,为血清学鉴别诊断方法gE-ELISA的建立打下很好的基础.同时gE-ELISA也能对野毒和疫苗毒进行鉴别.

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