小反刍兽疫病毒芯片式数字PCR检测方法的建立及应用

杨鸣发; 马云云; 于志亚; 刘家森; 康洪涛; 姜骞; 曲连东

首页> 中文期刊> 《中国动物检疫》 >小反刍兽疫病毒芯片式数字PCR检测方法的建立及应用

小反刍兽疫病毒芯片式数字PCR检测方法的建立及应用

开具论文收录证明 >>

期刊封面封底目录下载 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

为建立一种准确、快速、敏感性更高的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)检测方法,建立了一种芯片式数字PCR(cdPCR)检测方法.根据GenBank中公布的PPRV Nigeria75/1疫苗株N基因序列设计1对引物,PCR扩增大小为166 bp片段,构建pMDTM18-N标准质粒并优化反应条件,建立了PPRV N基因cdPCR检测方法,并与实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测方法的灵敏性、重复性、特异性和临床样品检测做了比较分析.结果显示:当质粒标准品浓度在1.22×(105～102)copies/μL范围时,cdPCR检测方法比普通RT-PCR灵敏度高1000倍,且稳定性好,特异性强;当标准品浓度在1.22×(105～10-3)copies/μL范围时,cdPCR与RT-qPCR相比具有相同的特异性,但灵敏性比RT-qPCR高100倍;与RT-qPCR测定结果(13.29±6.74)copies/μL相比,cdPCR的最低检测限更低,约为(0.44±0.14)copies/μL;cdPCR对47份临床样本的PPRV核酸阳性检出率(25.5％)高于RT-qPCR(17.0％).结果表明,建立的cdPCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为预防PPR早期流行提供了一种快速有效的诊断和定量检测方法.

著录项

来源
《中国动物检疫》 |2021年第12期|91-98|共8页
作者
杨鸣发; 马云云; 于志亚; 刘家森; 康洪涛; 姜骞; 曲连东;
展开▼
作者单位

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/自然疫源性人畜共患病团队黑龙江哈尔滨 150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/自然疫源性人畜共患病团队黑龙江哈尔滨 150001;

东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨 150030;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/自然疫源性人畜共患病团队黑龙江哈尔滨 150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/自然疫源性人畜共患病团队黑龙江哈尔滨 150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/自然疫源性人畜共患病团队黑龙江哈尔滨 150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/自然疫源性人畜共患病团队黑龙江哈尔滨 150001;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
小反刍兽疫病毒(PPRV); 芯片式数字PCR(cdPCR); 实时荧光定量PCR(RT-qPCR);

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 小反刍兽疫病毒和蓝舌病病毒多重荧光RT-LAMP鉴别检测方法的建立及应用 [J] . 范晴 ,邓显文 ,刘加波 . 动物医学进展 . 2020,第004期
2. 小反刍兽疫病毒荧光RT-PCR检测方法的建立与应用 [J] . 王昌建 ,邹玖零 ,何世成 . 中国动物检疫 . 2016,第006期
3. 小反刍兽疫病毒间接ELISA抗体检测方法的建立与初步应用 [J] . 贾凤芹 ,李刚 ,李伟 . 中国畜牧兽医 . 2009,第012期
4. 猪圆环病毒3型微滴式数字PCR检测方法的建立与应用 [J] . 李原野 ,陈世界 ,林华 . 江苏农业学报 . 2021,第002期
5. 基于微滴式数字PCR技术对猪内源逆转录病毒拷贝数的检测方法的建立及应用 [J] . 卢天宇 ,高虹 ,杨博超 . 中国比较医学杂志 . 2021,第009期
6. 小反刍兽疫病毒(PPRV)与蓝舌病病毒(BTV)双重荧光RT-PCR快速检测方法的建立 [C] . 李儒曙 ,苏惠龙 ,罗宝正 . 第27届广东畜牧兽医科技大会 . 2018
7. 马疱疹病毒1型QuantStudio™3D数字PCR检测方法的建立与应用 [A] . 陈凯云 . 2020

小反刍兽疫病毒芯片式数字PCR检测方法的建立及应用

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅