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一种以酶为基础的简单、可靠的高通量筛选抗大肠杆菌抗菌肽方法的发现

         

摘要

抗生素的滥用已给抗生素耐药性的形式造成了很大的问题。尽管新的抗菌药物发现计划已从20年前开始实施,但我们仍未能成功识别有可能成为治疗微生物感染的新治疗药物的新分子。在大多数筛选研究中的一个主要问题是对高通量技术的要求。鉴于此,我们在这里介绍一种以酶为基础的可靠的方法筛选抗大肠杆菌的抗菌剂。这种方法是基于细胞内固有酶在膜损伤或破坏的情况下裂解邻硝基苯基β-D-吡喃半乳糖苷(无色)向邻硝基苯酚(ONP)(有色)转化的能力。与其他现有方法相比,我们相信,我们的方法可通过一个简单的方式测定ONP产生,让用户能实时监控抗菌药物作用。尽管这种方法可应用到其他菌株,但我们的经验表明,人们必须小心,特别是当存在于细菌中的颜料或代谢产物具有相同波长吸光度的时候。

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