黑曲霉木聚糖酶(xynZF-2)基因克隆、表达及酶学性质分析

付冠华; 刘振华; 王丹丹; 周晨妍

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黑曲霉木聚糖酶(xynZF-2)基因克隆、表达及酶学性质分析

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利用RT-PCR技术从黑曲霉(Aspergillus niger) XZ-3S中成功克隆出木聚糖酶基因(xynZF-2)的cDNA序列(Genbank登录号为:JQ700382).该基因核苷酸序列阅读框全长678bp,编码225个氨基酸,其中成熟肽为107个氨基酸.以重组质粒pUCm-T-xynZF-2为模板,扩增得到编码xynZF-2成熟肽的cDNA片段(624bp).将其与表达载体pET-28a连接,构建重组表达载体pET-28a-xynZF-2,并转化大肠杆菌(Escherichia coli) BL2 1(DE3),获得重组工程菌BL21/xynZF-2.经IPTG诱导表达,木聚糖酶的的比酶活最高可达42.33U/mg.重组表达的木聚糖酶最适反应温度为40℃,最适反应pH为5.0,在碱性条件下具有良好的稳定性.Fe3+对酶的激活作用最为明显.

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来源
《中国酿造》 |2012年第11期|78-82|共5页
作者
付冠华; 刘振华; 王丹丹; 周晨妍;
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作者单位

新乡医学院生命科学技术系;

河南省医学遗传学与分子靶向药物高校重点实验室培育基地;

河南新乡453003;

新乡医学院生命科学技术系;

河南省医学遗传学与分子靶向药物高校重点实验室培育基地;

河南新乡453003;

新乡医学院生命科学技术系;

河南省医学遗传学与分子靶向药物高校重点实验室培育基地;

河南新乡453003;

新乡医学院生命科学技术系;

河南省医学遗传学与分子靶向药物高校重点实验室培育基地;

河南新乡453003;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
黑曲霉; 木聚糖酶; 克隆; 表达; 酶学性质;

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