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阻断Smad3对转化生长因子β1诱导Ⅰ型胶原表达的影响

         

摘要

目的 观察siRNA-Smad3对TGF-β1诱导的肌成纤维细胞(C2C12)分泌Ⅰ型胶原的影响.方法 用不同浓度的TGF-β1(0、1、5和10 ng/mL)干预C2C12细胞24 h,200 pmol/L siRNA-smad3转染C2C12细胞24 h,用ELISA和RT-PCR方法测定Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达.结果 0、1、5和10 ng/mLTGF-β1干预C2C12细胞,Ⅰ型胶原蛋白(ng/mL)检测结果分别为(616±16),(713±19),(783±23),(853±17),Ⅰ型胶原mRNA表达(Ⅰ型胶原/β-actin光密度比值)分别为(0.93±0.08),(1.83±0.17),(2.50±0.29),(2.94±0.14),三组间相互比较P均<0.01.200 pmol/L siRNA-Smad3转染C2C12细胞24 h后,用5 ng/mL TGF-β1分别干预24 h后检测Ⅰ型胶原蛋白:实验组、空白对照组、内对照组分别为(413±20)、(473±29)、(571±29)ng/mL;Ⅰ型胶原mRNA表达分别为(0.78±0.17)、(0.86±0.10)、(1.85±0.19).内对照组表达增强(与实验组比较P<0.05).结论 TGF-β1促进C2C12细胞Ⅰ型胶原合成与mRNA表达呈剂量依赖性;siRNA阻断Smad3表达,抑制了TGF-β1促进Ⅰ型胶原合成与mRNA表达的作用.

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