Smad3

摘要： 背景:失神经骨骼肌萎缩尚缺乏较有效的治疗方法,预后差,microRNA在体内的表达谱不清楚。目的:采用高通量测序技术分析失神经支配骨骼肌萎缩大鼠microRNA表达谱及转化生长因子β1/Smad3信号通路的变化,探讨microRNA在骨骼肌萎缩中的作用及其机制。方法:12只SD大鼠随机分为2组,实验组采用坐骨神经截断的方法建立失神经肌萎缩模型,对照组仅暴露坐骨神经后缝合伤口。完整取下大鼠双侧腓肠肌计算肌湿质量比,苏木精-伊红染色观察肌萎缩和纤维化情况并测定肌纤维横截面积;应用Illumina HiSeq 2500测序技术筛查骨骼肌组织中的microRNA表达谱;结合火山图、层次聚类图、基因本体论、京都基因与基因组百科全书通路分析差异表达基因参与骨骼肌代谢的生物过程;采用实时荧光定量PCR验证候选基因在肌肉组织中的差异表达;Western blot检测转化生长因子β1、p-Smad3蛋白表达。结果与结论:①与对照组相比,实验组腓肠肌湿质量比和横截面积明显降低(P0.0),筛选出显著差异表达的microRNA共14个,其中2个表达上调,12个表达下调;③生物学功能和通路分析结果提示,miR-1247-3p、miR-132-5p、miR-21-3p、miR-363-3p、miR-451-5p等具有显著差异表达的microRNAs显著富集于细胞增殖、分化、凋亡等生物过程及转化生长因子β信号通路;④实时荧光定量PCR结果显示,miR-21-3p在实验组腓肠肌组织中呈显著低表达(P<0.001),与测序结果趋势一致;⑤Western blot结果显示,转化生长因子β1、p-Smad3蛋白表达水平较对照组明显升高(P<0.05);⑥提示microRNA在骨骼肌萎缩生理病理过程中扮演关键角色,miR-21-3p可能通过激活转化生长因子β1/Smad3信号通路的生物活性,进而在骨骼肌细胞代谢中发挥作用。

摘要： 背景:人早孕蜕膜间充质干细胞及丹参酮ⅡA具有抗粘连作用,均对宫腔粘连有一定疗效,但其具体机制待进一步研究.目的:探索人早孕蜕膜间充质干细胞联合丹参酮ⅡA治疗宫腔粘连的效果及机制.方法:采用胶原酶Ⅰ消化法分离培养人早孕蜕膜间充质干细胞,选取45只雌性4-6周龄SD大鼠,随机分为5组,每组9只,分别为对照组、模型组、丹参酮组、干细胞组及联合治疗组.对照组进行假手术;模型组进行机械刮宫造模后不干预;干细胞组则在造模后7 d经宫旁注射0.2 mL人早孕蜕膜间充质干细胞悬液(1×109 L-1),每隔3 d注射1次,共3次;丹参酮组在造模后7 d灌胃11 mg/(kg·d)丹参酮ⅡA溶液,持续灌胃1周;联合治疗组则为上述两种治疗方式的联合运用.对照组及模型组在术后5,10,15 d取材,各治疗组则在最后一次治疗后5,10,15 d后取材,苏木精-伊红染色、Masson染色观察受损子宫的愈合程度;ELISA检测血清雌激素E2及血管内皮生长因子水平;q-PCR法检测子宫组织中miR-29a mRNA表达;Western blot检测子宫组织转化生长因子β1、Smad3及基质金属蛋白酶9蛋白表达.结果 与结论:①与对照组比较,模型组大鼠子宫内膜纤维化面积比显著增加(P<0.05),而内膜厚度及腺体数量显著下降(P<0.05);与模型组比较,联合治疗组大鼠子宫内膜纤维化面积比显著下降(P<0.05),而内膜厚度及腺体数量显著增加(P<0.05),干细胞组及丹参酮组大鼠子宫内膜纤维化面积比也显著下降(P<0.05);②与模型组比较,丹参酮组、干细胞组及联合治疗组血清雌激素E2水平显著升高(P<0.05),血管内皮生长因子水平显著下降(P<0.05),miR-29a mRNA表达显著升高(P<0.05),联合治疗组转化生长因子β1、Smad3蛋白表达明显下降(P<0.05),丹参酮组基质金属蛋白酶9蛋白表达明显上升(P<0.05);③结果 表明,人早孕蜕膜间充质干细胞与丹参酮ⅡA联合治疗可有效修复大鼠子宫内膜,其机制可能通过调控miR-29a降低转化生长因子β1、Smad3蛋白水平,进而改善纤维化.

摘要： 探索Smad3促进乳腺癌发展的相关蛋白,为乳腺癌临床诊断和免疫治疗提供靶点。从癌症基因组图谱(TCGA)数据库获得乳腺癌病人转录组数据和临床数据;Estimate系统评估肿瘤微环境的基质细胞和免疫细胞,绘制Kaplan-Meier生存曲线,R语言分析得到肿瘤微环境差异基因。Smad3差异基因联合Immport网站免疫差异基因数据筛选Smad3相关免疫差异基因。筛选出的差异基因进行基因本体(GO)富集分析和蛋白互作(PPI)分析。Smad3免疫差异基因与肿瘤微环境差异基因取交集得到两者关联基因;乳腺癌小鼠模型验证Smad3与交集基因的关联性。结果显示,在肿瘤免疫微环境中免疫细胞高低与病人生存时间相关。进一步通过差异基因分析得知Smad3与基质金属蛋白酶9(MMP9)具有关联性;小鼠模型证实磷酸化的Smad3(p-Smad3)含量越高MMP9表达越高,肿瘤生长越快。由此得出结论,Smad3与MMP9在肿瘤微环境中具有极高的关联性,能调控肿瘤免疫环境;抑制Smad3的磷酸化能显著减少MMP9的表达,减缓肿瘤的生长。

摘要： 目的:探讨姜黄素对兔耳增生性瘢痕生长的抑制作用及其对TGF-β1/Smad信号通路的影响。方法:建立兔耳增生性瘢痕模型,随机分为模型组(B组)、姜黄素低剂量组(C组)、姜黄素高剂量组(D组);C组及D组分别涂抹浓度为2.5%及10%的姜黄素软膏,B组涂抹不含姜黄素的软膏基质;连续用药28d,同时以正常兔耳作对照组(A组)。对各组组织进行大体形态学观察及病理学分析,RT-PCR法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2和Smad3 mRNA的表达,比较各组治疗后的变化。结果:模型组中瘢痕增生明显,瘢痕颜色深红,质地较硬,姜黄素药物组中瘢痕生长受到抑制,瘢痕颜色变浅,质地变软,以姜黄素高剂量组改善尤为明显;模型组中瘢痕增生指数(HI)、成纤维细胞密度(NA)、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.05);姜黄素药物组中HI、NA、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA明显低于模型组(P<0.05),且高剂量组变化更明显(P<0.05)。结论:姜黄素可以明显抑制增生性瘢痕的形成,其机制可能为通过调控TGF-β1/Smad信号通路来完成。

摘要： 目的·探究转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGFβ)家族下游的关键转录因子SMAD蛋白(drosophila mothers against decapentaplegic protein)——SMAD2和SMAD3在人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)体外分化过程中的不同作用。方法·在hESC中,通过蛋白质印迹法(Western blotting)检测SMAD2和SMAD3在分化过程中的蛋白表达水平。通过CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9)技术构建SMAD2敲除(SMAD2 knockout,SMAD2KO)和SMAD3敲除(SMAD3 knockout,SMAD3KO)的细胞系。利用免疫荧光染色检测SMAD蛋白丢失对多能性因子八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)和性别决定区Y框蛋白2(sex determining region Y-box 2,SOX2),神经外胚层(neuroectoderm,NE)标志因子配对盒因子6(paired box 6,PAX6)和性别决定区Y框蛋白1(sex determining region Y-box 1,SOX1)以及中内胚层(mesendoderm,ME)标志因子SOX17的表达影响;同时使用流式细胞术鉴定SMAD2敲除或SMAD3敲除对NE标志因子PAX6以及ME标志因子SOX17、脱中胚蛋白(eomesodermin,EOMES)和C-X-C模体趋化因子受体4(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)表达的影响。在SMAD2KO和SMAD3KO细胞中分别过表达SMAD2和SMAD3质粒,通过Western blotting检测SMAD2和SMAD3蛋白回补的效果,并利用实时定量PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)检测SMAD蛋白回补后对分化过程中的ME关键因子EOMES、叉头框转录因子A2(forkhead box A2,FOXA2)和GSC同源盒(goosecoid homeobox,GSC)表达的影响。结果·虽然SMAD2和SMAD3的蛋白序列较为相似,但是SMAD2才是hESC中主要表达的蛋白因子。免疫荧光染色结果表明,SMAD2敲除和SMAD3敲除并不会影响hESC多能性因子OCT4和SOX2的表达;同时流式细胞术发现,SMAD蛋白的缺失也不会影响NE标志因子PAX6和SOX1的表达。SMAD3敲除对hESC向ME分化没有显著的影响,而SMAD2敲除严重阻碍了hESC表达ME标志因子SOX17、EOMES和CXCR4。通过qRT-PCR检测显示在SMAD2KO细胞中过表达外源性SMAD2可以有效地恢复ME基因EOMES、FOXA2和GSC的表达,而在SMAD3KO细胞中回补SMAD3对这些ME基因的表达无影响。结论·SMAD2和SMAD3在hESC向ME分化过程中的调控作用不同。SMAD2而非SMAD3是决定hESC表达ME基因的关键。

摘要： 目的探索肺ECM水凝胶是否抑制TGF-β1/smad3通路,减轻放射性肺纤维化。方法20 Gy照射制备大鼠放射性肺纤维化模型,将27只大鼠随机分为3组(n=9):Control组、IR+NS组、IR+ECM组;Control组无处理,其余两组造模,在造模后0.5h,IR+NS组气管内注射0.9%氯化钠500μl,IR+ECM组注射等量肺ECM水凝胶,第16周取材,Elisa法测血清TNF-α、IL-6、TGF-β1,左肺固定后做病理染色(HE、Masson),右肺深低温保存做western blot、羟脯氨酸检测。结果与IR+NS组比,IR+ECM组大鼠血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平下降(P<0.05),肺系数降低(P<0.05),HE及Masson染色显示肺泡炎及纤维化程度改善,肺组织羟脯氨酸含量下降(P<0.05),TGF-β1、Smad3、p-Smad3、α-SMA蛋白表达下降(P<0.05)。结论肺ECM水凝胶能减轻大鼠放射性肺纤维化,可能是通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路实现的。

摘要： 目的 探究沙棘黄酮(TFH)对大鼠动脉粥样硬化(AS)斑块的影响及机制。方法 SPF级、雄性SD大鼠100只,随机分为对照组、模型组、阳性对照组及实验组,每组25只。模型组、阳性对照组及实验组均采用腹腔注射维生素D3,高脂饲料喂养8 w构建AS大鼠模型。造模成功后,阳性对照组给予阿托伐他汀钙10 mg/(kg·d)灌胃,实验组给予TFH 200 mg/(kg·d)灌胃,对照组与模型组则给予等量生理盐水灌胃,各组均按上述处理方式干预4 w。4 w后,采用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;采用流式细胞仪法测定血清T淋巴细胞亚群水平;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠主动脉病理学形态变化;采用免疫组织化学法检测AS斑块内Smad3表达情况。结果 与对照组相比,其余3组血清TC、TG、LDL-C、CD8^(+)和Smad3蛋白阳性细胞百分比均显著升高,HDL-C、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)显著降低;与模型组相比,阳性对照组及实验组TC、TG、LDL-C、CD8^(+)、Smad3蛋白阳性细胞百分比均显著降低,HDL-C、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均显著升高(均P<0.05);与阳性对照组相比,实验组TC、TG、LDL-C、CD8^(+)和Smad3蛋白阳性细胞百分比均显著升高,HDL-C、CD4^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)均显著降低(P<0.05)。结论 TFH可降低AS大鼠的血脂,减轻主动脉损伤,并可调节T淋巴细胞亚群分布,降低Smad3表达,进而保护血管。

摘要： 目的探讨miR-29c在肾纤维化大鼠中的表达水平及其与肾间质纤维化(RIF)程度的关系。方法将20只4周龄雄性SD大鼠随机分为单侧输尿管梗阻(UUO)组和假手术组(Sham组),各10只。结扎UUO组大鼠左侧输尿管,仅游离Sham组大鼠输尿管但不结扎。造模后3 d、7 d,比较两组大鼠血清和肾组织中miR-29c的表达水平、肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和Smad3蛋白表达水平,以及RIF程度评分,并采用Spearman秩相关检验分析血清和肾组织中miR-29c表达水平与RIF程度的关系。结果造模后3 d、7 d,UUO组大鼠的血清和肾组织中miR-29c表达水平均低于Sham组,肾组织中TGF-β1和Smad3蛋白表达水平均高于Sham组,RIF程度评分高于Sham组;建模后7 d,UUO组血清和肾组织miR-29c表达水平较建模后3 d降低,肾组织TGF-β1、Smad3蛋白表达水平和RIF程度评分较建模后3 d升高(均P<0.05)。相关性分析显示,UUO组大鼠血清和肾组织中miR-29c表达水平与肾组织中TGF-β1和Smad3蛋白表达水平及RIF程度评分均呈负相关(均P<0.05)。结论肾纤维化大鼠血清与肾组织中的miR-29c表达水平降低,且与RIF程度呈负相关,miR-29c可能通过调节TGF-β1/Smad3通路参与RIF的发生与发展。

摘要： 目的观察桂枝去桂加茯苓白术汤含药血清对TGF-β_(1)诱导的人肾小管上皮细胞上皮—间充质转化(EMT)的影响,并探讨其作用机制。方法取雄性SD大鼠40只,随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组和空白对照组各10只,其中低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予桂枝去桂加茯苓白术汤5、10、20 g/(kg·d)灌胃,空白对照组给予等体积生理盐水灌胃,连续7 d。腹主动脉采血,取上清。将HK-2细胞分为5组,空白对照组加入空白对照组大鼠血清;TGF-β_(1)组加入5 ng/mLTGF-β_(1);低浓度含药血清干预组先加入低剂量组大鼠含药血清后,再加入5 ng/mLTGF-β_(1);中浓度含药血清干预组先加入中剂量组大鼠含药血清后,再加入5 ng/mLTGF-β_(1);高浓度含药血清干预组先加入高剂量组大鼠含药血清后,再加入5 ng/mLTGF-β_(1);各组均培养48 h。采用Westernblotting法检测各组细胞EMT标志蛋白E-cadherin、α-SMA、Vimintin蛋白表达,MAPK信号通路相关蛋白ERK1/2、p38、JNK及其磷酸化水平,Smad3信号通路中Smad3及p-Smad3蛋白表达。结果与空白对照组比较,TGF-β_(1)组α-SMA、Vimintin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05或<0.01);与TGF-β_(1)组比较,低浓度含药血清干预组E-cadherin及α-SMA蛋白表达差异无统计学意义;中浓度及高浓度含药血清干预组α-SMA、Vimintin蛋白水平降低,E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05或<0.01)。与空白对照组比较,TGF-β_(1)组ERK1/2、JNK、P38、Smad3蛋白磷酸化水平均升高(P均<0.05);与TGF-β_(1)组比较,低浓度含药血清干预组p38蛋白磷酸化水平降低,中浓度含药血清干预组JNK、p38、Smad3蛋白磷酸化水平降低,高浓度含药血清干预组ERK1/2、JNK、p38、Smad3蛋白磷酸化水平均降低(P<0.05或<0.01)。结论桂枝去桂加茯苓白术汤能够抑制TGF-β_(1)诱导的HK-2细胞EMT过程,其作用机制可能与抑制TGF-β_(1)/Smad3、TGF-β_(1)/MAPK信号通路的激活有关。

摘要： 目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)基因缺失后中波紫外(UVB)辐射对皮肤组织的影响。方法制备TGF-β1基因缺失小鼠,使用UVB辐射制备皮肤损伤模型。实验分组为野生型设为对照组(Con组),野生型给予UVB照射设为Con+UVB组,TGF-β1-/-给予UVB照射设为TGF-β1-组。根据是否给予野生型小鼠TGF-β1注射,分为TGF-β1注射组TGF-β1(+)和TGF-β1不注射组TGF-β1(-)。分别观察小鼠皮肤损伤部位Smad3、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的mRNA表达情况,观察小鼠血清中类胰岛素生长因子-1(IGF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)以及角质细胞生长因子(KGF)的含量。同时给UVB辐射皮肤损伤的野生型小鼠注射TGF-β1,观察MMP-1、MMP-3、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的mRNA表达情况,及血清中IGF-1、VEGF、KGF的含量。结果Con+UVB组Smad3表达和Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原含量低于Con组,血清中IGF-1、VEGF以及KGF含量低于Con组,而MMP-1和MMP-3的表达高于Con组,差异有统计学意义(P<0.05);TGF-β1-组Smad3表达和Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原含量低于Con+UVB组,血清中IGF-1、VEGF以及KGF含量低于Con+UVB组,而MMP-1和MMP-3的表达高于Con+UVB组,差异有统计学意义(P<0.05);TGF-β1(+)组Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原含量高于TGF-β1(-)组,血清中IGF-1、VEGF以及KGF含量高于TGF-β1(-)组,而MMP-1和MMP-3的表达低于TGF-β1(-)组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TGF-β1基因缺失会加剧UVB辐射对皮肤的损伤,给予TGF-β1补充可减少UVB辐射对皮肤的损伤。

摘要： 目的:探讨鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(HF)的作用及其机制。rn 方法:雄性SD大鼠90只,随机取10只作为正常对照组(A),其余大鼠用皮下注射40％四氯化碳(CCl4)橄榄油油剂0.3ml/100g诱导大鼠肝纤维化模型8周,于第2周时随机处死5只证实HF形成后随机分为肝纤维化模型组(B)、鳖甲煎改良方高(C)28.4g/(kg·d)、中(D)14.2 g/(kg·d)、低剂量组(E)7.1 g/(kg·d)、复方鳖甲煎丸对照组(F)0.6 g/(kg·d),每组15只。C、D、E、F组给予1ml/(100 g·d)相应药液灌胃治疗,A、B组同时给予等剂量的生理盐水灌胃处理。8周后取肝组织作HE染色观察肝纤维化程度变化:RT—PCR检测TGF—β1、smad3和smad7mRNA表达,免疫组化分析TGF—β1、smad3和smad7蛋白表达。rn 结果:8周后,与B组比较,C、D、E、F组肝小叶结构破坏明显减轻, 肝纤维化程度分级较模型组明显好转,胶原纤维所占面积显著缩小;TGF-β1、Smad3mRNA及蛋白表达显著减少(P<0.01),smadTmRNA及蛋白的表达明显增加(P<0.01)且C、D、E组疗效强于F组(P<0.01)。rn 结论:鳖甲煎改良方能够显著减轻CCl4导致的大鼠肝纤维化程度,其作用机制可能与鳖甲煎改良方调控TGF—β1和sman3/7信号转导蛋白表达有关。

摘要： 目的:探讨鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(HF)的作用及其机制。rn 方法:雄性SD大鼠90只,随机取10只作为正常对照组(A),其余大鼠用皮下注射40％四氯化碳(CCl4)橄榄油油剂0.3ml/100g诱导大鼠肝纤维化模型8周,于第2周时随机处死5只证实HF形成后随机分为肝纤维化模型组(B)、鳖甲煎改良方高(C)28.4g/(kg·d)、中(D)14.2 g/(kg·d)、低剂量组(E)7.1 g/(kg·d)、复方鳖甲煎丸对照组(F)0.6 g/(kg·d),每组15只。C、D、E、F组给予1ml/(100 g·d)相应药液灌胃治疗,A、B组同时给予等剂量的生理盐水灌胃处理。8周后取肝组织作HE染色观察肝纤维化程度变化:RT—PCR检测TGF—β1、smad3和smad7mRNA表达,免疫组化分析TGF—β1、smad3和smad7蛋白表达。rn 结果:8周后,与B组比较,C、D、E、F组肝小叶结构破坏明显减轻, 肝纤维化程度分级较模型组明显好转,胶原纤维所占面积显著缩小;TGF-β1、Smad3mRNA及蛋白表达显著减少(P<0.01),smadTmRNA及蛋白的表达明显增加(P<0.01)且C、D、E组疗效强于F组(P<0.01)。rn 结论:鳖甲煎改良方能够显著减轻CCl4导致的大鼠肝纤维化程度,其作用机制可能与鳖甲煎改良方调控TGF—β1和sman3/7信号转导蛋白表达有关。

摘要： 目的:探讨鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(HF)的作用及其机制。rn 方法:雄性SD大鼠90只,随机取10只作为正常对照组(A),其余大鼠用皮下注射40％四氯化碳(CCl4)橄榄油油剂0.3ml/100g诱导大鼠肝纤维化模型8周,于第2周时随机处死5只证实HF形成后随机分为肝纤维化模型组(B)、鳖甲煎改良方高(C)28.4g/(kg·d)、中(D)14.2 g/(kg·d)、低剂量组(E)7.1 g/(kg·d)、复方鳖甲煎丸对照组(F)0.6 g/(kg·d),每组15只。C、D、E、F组给予1ml/(100 g·d)相应药液灌胃治疗,A、B组同时给予等剂量的生理盐水灌胃处理。8周后取肝组织作HE染色观察肝纤维化程度变化:RT—PCR检测TGF—β1、smad3和smad7mRNA表达,免疫组化分析TGF—β1、smad3和smad7蛋白表达。rn 结果:8周后,与B组比较,C、D、E、F组肝小叶结构破坏明显减轻, 肝纤维化程度分级较模型组明显好转,胶原纤维所占面积显著缩小;TGF-β1、Smad3mRNA及蛋白表达显著减少(P<0.01),smadTmRNA及蛋白的表达明显增加(P<0.01)且C、D、E组疗效强于F组(P<0.01)。rn 结论:鳖甲煎改良方能够显著减轻CCl4导致的大鼠肝纤维化程度,其作用机制可能与鳖甲煎改良方调控TGF—β1和sman3/7信号转导蛋白表达有关。

摘要： 目的:探讨鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(HF)的作用及其机制。rn 方法:雄性SD大鼠90只,随机取10只作为正常对照组(A),其余大鼠用皮下注射40％四氯化碳(CCl4)橄榄油油剂0.3ml/100g诱导大鼠肝纤维化模型8周,于第2周时随机处死5只证实HF形成后随机分为肝纤维化模型组(B)、鳖甲煎改良方高(C)28.4g/(kg·d)、中(D)14.2 g/(kg·d)、低剂量组(E)7.1 g/(kg·d)、复方鳖甲煎丸对照组(F)0.6 g/(kg·d),每组15只。C、D、E、F组给予1ml/(100 g·d)相应药液灌胃治疗,A、B组同时给予等剂量的生理盐水灌胃处理。8周后取肝组织作HE染色观察肝纤维化程度变化:RT—PCR检测TGF—β1、smad3和smad7mRNA表达,免疫组化分析TGF—β1、smad3和smad7蛋白表达。rn 结果:8周后,与B组比较,C、D、E、F组肝小叶结构破坏明显减轻, 肝纤维化程度分级较模型组明显好转,胶原纤维所占面积显著缩小;TGF-β1、Smad3mRNA及蛋白表达显著减少(P<0.01),smadTmRNA及蛋白的表达明显增加(P<0.01)且C、D、E组疗效强于F组(P<0.01)。rn 结论:鳖甲煎改良方能够显著减轻CCl4导致的大鼠肝纤维化程度,其作用机制可能与鳖甲煎改良方调控TGF—β1和sman3/7信号转导蛋白表达有关。

摘要： 目的:探讨鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(HF)的作用及其机制。rn 方法:雄性SD大鼠90只,随机取10只作为正常对照组(A),其余大鼠用皮下注射40％四氯化碳(CCl4)橄榄油油剂0.3ml/100g诱导大鼠肝纤维化模型8周,于第2周时随机处死5只证实HF形成后随机分为肝纤维化模型组(B)、鳖甲煎改良方高(C)28.4g/(kg·d)、中(D)14.2 g/(kg·d)、低剂量组(E)7.1 g/(kg·d)、复方鳖甲煎丸对照组(F)0.6 g/(kg·d),每组15只。C、D、E、F组给予1ml/(100 g·d)相应药液灌胃治疗,A、B组同时给予等剂量的生理盐水灌胃处理。8周后取肝组织作HE染色观察肝纤维化程度变化:RT—PCR检测TGF—β1、smad3和smad7mRNA表达,免疫组化分析TGF—β1、smad3和smad7蛋白表达。rn 结果:8周后,与B组比较,C、D、E、F组肝小叶结构破坏明显减轻, 肝纤维化程度分级较模型组明显好转,胶原纤维所占面积显著缩小;TGF-β1、Smad3mRNA及蛋白表达显著减少(P<0.01),smadTmRNA及蛋白的表达明显增加(P<0.01)且C、D、E组疗效强于F组(P<0.01)。rn 结论:鳖甲煎改良方能够显著减轻CCl4导致的大鼠肝纤维化程度,其作用机制可能与鳖甲煎改良方调控TGF—β1和sman3/7信号转导蛋白表达有关。

摘要： 目的：探讨TGF-β1/Smad 3信号转导通路对皮肤成纤维细胞的具体调控作用及其机制。rn 方法：将原代分离培养并经过鉴定的小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad 3 KO型)分为六组：野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+SB 431542组、野生型FB+SB431542+TGF-β1组、Smad 3 KO FB组和Smad3 KO FB+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后，直接以TGF-β1刺激或经SB 431542预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞抽提总RNA，以实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β1、Smad 3、PCNA、MMP 2、MMP 9和TIMP-1的变化情况，细胞培养液上清经离心超滤浓缩后进行明胶酶谱分析，检测MMP-2和MMP-9的活性。rn 结果：TGF-β1促进成纤维细胞中TGF-β1、Smad3、PCNA、MMP 2、MMP 9的表达，抑制TIMP-1表达;抑制Smad 3可显著增加MMP 2和MMP 9的表达并降低TIMP-1表达。rn 结论：Smad 3抑制TGF-β1的自身正反馈，参与促进成纤维细胞增殖的信号途径，同时还对MMP 2/9的表达起负向调控作用而对TIMP—1起正向调控作用。

摘要： 目的：探讨TGF-β1/Smad 3信号转导通路对皮肤成纤维细胞的具体调控作用及其机制。rn 方法：将原代分离培养并经过鉴定的小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad 3 KO型)分为六组：野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+SB 431542组、野生型FB+SB431542+TGF-β1组、Smad 3 KO FB组和Smad3 KO FB+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后，直接以TGF-β1刺激或经SB 431542预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞抽提总RNA，以实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β1、Smad 3、PCNA、MMP 2、MMP 9和TIMP-1的变化情况，细胞培养液上清经离心超滤浓缩后进行明胶酶谱分析，检测MMP-2和MMP-9的活性。rn 结果：TGF-β1促进成纤维细胞中TGF-β1、Smad3、PCNA、MMP 2、MMP 9的表达，抑制TIMP-1表达;抑制Smad 3可显著增加MMP 2和MMP 9的表达并降低TIMP-1表达。rn 结论：Smad 3抑制TGF-β1的自身正反馈，参与促进成纤维细胞增殖的信号途径，同时还对MMP 2/9的表达起负向调控作用而对TIMP—1起正向调控作用。

摘要： 目的：探讨TGF-β1/Smad 3信号转导通路对皮肤成纤维细胞的具体调控作用及其机制。rn 方法：将原代分离培养并经过鉴定的小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad 3 KO型)分为六组：野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+SB 431542组、野生型FB+SB431542+TGF-β1组、Smad 3 KO FB组和Smad3 KO FB+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后，直接以TGF-β1刺激或经SB 431542预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞抽提总RNA，以实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β1、Smad 3、PCNA、MMP 2、MMP 9和TIMP-1的变化情况，细胞培养液上清经离心超滤浓缩后进行明胶酶谱分析，检测MMP-2和MMP-9的活性。rn 结果：TGF-β1促进成纤维细胞中TGF-β1、Smad3、PCNA、MMP 2、MMP 9的表达，抑制TIMP-1表达;抑制Smad 3可显著增加MMP 2和MMP 9的表达并降低TIMP-1表达。rn 结论：Smad 3抑制TGF-β1的自身正反馈，参与促进成纤维细胞增殖的信号途径，同时还对MMP 2/9的表达起负向调控作用而对TIMP—1起正向调控作用。

摘要： 目的：探讨TGF-β1/Smad 3信号转导通路对皮肤成纤维细胞的具体调控作用及其机制。rn 方法：将原代分离培养并经过鉴定的小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad 3 KO型)分为六组：野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+SB 431542组、野生型FB+SB431542+TGF-β1组、Smad 3 KO FB组和Smad3 KO FB+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后，直接以TGF-β1刺激或经SB 431542预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞抽提总RNA，以实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β1、Smad 3、PCNA、MMP 2、MMP 9和TIMP-1的变化情况，细胞培养液上清经离心超滤浓缩后进行明胶酶谱分析，检测MMP-2和MMP-9的活性。rn 结果：TGF-β1促进成纤维细胞中TGF-β1、Smad3、PCNA、MMP 2、MMP 9的表达，抑制TIMP-1表达;抑制Smad 3可显著增加MMP 2和MMP 9的表达并降低TIMP-1表达。rn 结论：Smad 3抑制TGF-β1的自身正反馈，参与促进成纤维细胞增殖的信号途径，同时还对MMP 2/9的表达起负向调控作用而对TIMP—1起正向调控作用。

摘要： 目的：探讨TGF-β1/Smad 3信号转导通路对皮肤成纤维细胞的具体调控作用及其机制。rn 方法：将原代分离培养并经过鉴定的小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad 3 KO型)分为六组：野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+SB 431542组、野生型FB+SB431542+TGF-β1组、Smad 3 KO FB组和Smad3 KO FB+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后，直接以TGF-β1刺激或经SB 431542预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞抽提总RNA，以实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β1、Smad 3、PCNA、MMP 2、MMP 9和TIMP-1的变化情况，细胞培养液上清经离心超滤浓缩后进行明胶酶谱分析，检测MMP-2和MMP-9的活性。rn 结果：TGF-β1促进成纤维细胞中TGF-β1、Smad3、PCNA、MMP 2、MMP 9的表达，抑制TIMP-1表达;抑制Smad 3可显著增加MMP 2和MMP 9的表达并降低TIMP-1表达。rn 结论：Smad 3抑制TGF-β1的自身正反馈，参与促进成纤维细胞增殖的信号途径，同时还对MMP 2/9的表达起负向调控作用而对TIMP—1起正向调控作用。

摘要： 本发明涉及一种Smad4蛋白可结合的DNA片段，其包含一个或多个Smad4蛋白结合框；还涉及该DNA片段的应用；还涉及一种用于检测细胞内Smad4转录调控活性的方法。通过使用本发明的DNA片段和方法，可直接针对性地检测细胞内Smad4的转录调控活性，而非仅仅检测其转录本或蛋白质的含量，从而使得能够更准确地分析Smad4作为转录因子在一些发育生物学和病理学发展中所起的作用。

摘要： 本发明提供了一种过表达SMAD3诱导体细胞重编程为乳腺上皮细胞的方法，可应用于高效精准的调控体内特定组织细胞重编程为乳腺上皮细胞，有利于体内乳腺再生与修复。

摘要： 本发明基于发现TGF‑β信号传导的一种重要的下游介质Smad3，在癌症的发生和发展中起到至关重要的作用。因此，本申请提供了通过抑制Smad3信号传导，例如通过给予Smad3抑制剂SIS3，来治疗癌症的新方法。还提供了通过抑制Smad3信号传导来治疗癌症的组合物和试剂盒。

摘要： 本发明涉及SMAD7的治疗应用。具体地，本发明提供了用于治疗炎性和/或组织损伤病症的方法和组合物。特别地，描述了局部地或全身地递送到炎症和/或组织损伤部位的Smad7组合物的用途。另一些具体的实施方案涉及由放射和/或化学治疗引起的副作用(包括但不限于粘膜炎)的治疗或预防。

摘要： 本发明涉及一种Smad4蛋白可结合的DNA片段，其包含一个或多个Smad4蛋白结合框；还涉及该DNA片段的应用；还涉及一种用于检测细胞内Smad4转录调控活性的方法。通过使用本发明的DNA片段和方法，可直接针对性地检测细胞内Smad4的转录调控活性，而非仅仅检测其转录本或蛋白质的含量，从而使得能够更准确地分析Smad4作为转录因子在一些发育生物学和病理学发展中所起的作用。

摘要： 本发明公开了一种Smad3蛋白作为卵巢癌抗顺铂耐药新靶点的应用。目前针对Smad3蛋白与卵巢癌的关系、及卵巢癌中顺铂耐药机制的关系尚未见研究。为了明确卵巢癌患者顺铂耐药的机制，为卵巢癌患者提供更明确的治疗策略和药物，本发明获得了调控顺铂敏感性的新分子靶标Smad3蛋白，表明Smad3蛋白作为卵巢癌抗顺铂耐药新靶点的应用。本发明采用双硫仑与顺铂联合应用于治疗卵巢癌，治疗效果优于单独的顺铂治疗效果。

摘要： 本发明公开了一种用于检测SMAD4基因全外显子突变的引物、方法及试剂盒，所述特异性引物包括扩增覆盖SMAD4基因全部12个外显子的正反向引物；本发明采用Sanger测序法检测SMAD4基因全外显子突变，可快速检测SMAD4基因全外显子的突变。利用本发明完成的检测结果准确，可以专一性鉴别SMAD4基因是否突变，确保了测定结果的准确性和唯一性；可辅助疾病诊断，提高疾病的风险评估，对早期干预、早期治疗有重要的参考意义。

摘要： 本发明公开了一种靶向Smad4/PELO相互作用的抑制前列腺癌细胞转移的小分子多肽，该靶向Smad4/PELO相互作用的抑制前列腺癌细胞转移的小分子多肽的氨基酸序列为：FCDYMFQQA。其能特异性地阻断Smad4与PELO的相互作用，抑制前列腺癌细胞的迁移及侵袭能力，小鼠实验也证实了该靶向Smad4/PELO相互作用的抑制前列腺癌细胞转移的小分子多肽可抑制前列腺癌细胞在体内的肺转移和肝转移，并提高裸鼠的生存率，达到抵抗肿瘤转移的效果，因此，可将其用于制备抗肿瘤药物或肿瘤诊断试剂，用于诊断或治疗前列腺癌。

摘要： 本发明属于生物传感器技术领域，涉及一种Smad4基因检测生物传感器及制备方法。本发明提高的Smad4基因检测生物传感器，包含Smad4基因检测DNA探针；所述Smad4基因检测DNA探针的核苷酸序列为：5’‑SH‑（CH2）6‑CATACCAGTCTAGACTTAT‑3’。本发明将电化学、磁性材料以及纳米分子相结合，检测Smad蛋白通路中Smad4序列，其检测特异性、灵敏度、生物相容性和检测限性能优异。

摘要： 本公开内容涉及寡核苷酸(例如，SMAD7反义寡核苷酸非对映体)的组合物以及制备、评价效力和使用该组合物的方法。