肝星状细胞

摘要： 法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)是核受体超家族的重要成员,以作为胆汁酸受体被大家所熟知。除了调节胆汁酸的合成和转运,FXR在调控葡萄糖代谢、甘油三酯代谢、炎症、凝血等方面也发挥重要作用。肝纤维化是慢性肝脏疾病发展成肝硬化的共同途径,终末期肝纤维化将导致肝硬化、肝衰竭,甚至危及生命。肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化是导致肝纤维化的重要原因。越来越多的证据表明FXR的内生性功能在生理和病理条件下调控HSCs的功能并影响肝纤维化,因此FXR可能成为治疗肝纤维化的重要靶点。本篇主要介绍FXR在肝星状细胞及其在肝纤维化中的作用。

摘要： 目的研究柚皮素(naringenin,NGN)对小鼠肝纤维化的抑制作用及机制。方法TGF-β1孵育LX2细胞24 h,构建体外纤维化模型,NGN(100、200μmol·L^(-1))处理细胞;喂饲8~10周龄雄性C57BL/6小鼠蛋氨酸-胆碱缺乏饲料6周,诱导小鼠肝脏纤维化模型,同时灌胃给予NGN(100 mg·kg^(-1)),研究NGN抑制肝纤维化的作用及机制。qRT-PCR检测α-SMA、col1和col3的基因水平;Western blot检测α-SMA、col1、TGF-β1、p-smad2和p-smad3的蛋白水平;HE染色和天狼猩红染色分别检测小鼠肝脏组织形态和纤维化程度。结果体内外实验均表明,与模型组相比,NGN处理明显降低了α-SMA、col1和col3的mRNA和蛋白表达水平,同时明显抑制TGF-β1/smad通路的激活。HE染色和天狼猩红染色结果同样表明,NGN处理与模型组相比明显降了MCD饲料诱导的肝脏纤维化程度。结论NGN可明显抑制TGF-β1诱导的LX2细胞纤维化及蛋氨酸-胆碱缺乏饲料诱导的小鼠肝纤维化,机制与其抑制TGF-β1/smad通路激活有关。

摘要： 目的观察应用扶正化瘀方后急性肝损伤小鼠模型肝脏CD8^(+)T淋巴细胞对共培养的肝星状细胞的影响,探讨扶正化瘀方预防肝纤维化的作用机制。方法18只SPF级雄性C57BL/6NCrl Vr小鼠随机分为正常组、模型组、扶正化瘀方组,每组6只。扶正化瘀方组提前给予扶正化瘀方灌胃5 d。实验前12 h以2 mL/kg体质量的剂量腹腔注射10%的CCl_(4),腹主静脉取血,留取血清并检测ALT、AST,留取部分肝脏做病理观察;应用流式细胞术分选小鼠肝脏CD8^(+)T淋巴细胞,预先小鼠体内用药,再与小鼠肝星状细胞株(JS 1)以2∶1比例共培养于96孔板中24 h、48 h,使用qPCR方法检测各组Col.ⅠmRNA和α-SMA mRNA表达变化。符合正态分布的计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用SNK-q或LSD-t检验。结果模型组的ALT和AST水平均显著高于正常组(P值均<0.0001)。扶正化瘀方组小鼠的ALT升高的幅度明显小于模型组(P<0.001)。HE染色显示,扶正化瘀方组小鼠肝细胞变性、坏死程度较模型组有所减轻。与正常组比较,模型组总淋巴细胞、CD45、CD4-CD8^(+)T、CD8^(+)CD28-T显著上升,而扶正化瘀方组与模型组相比较,上述淋巴细胞比例显著降低(P值均<0.001)。自各组小鼠肝脏分离的CD8^(+)T淋巴细胞与JS 1共培养48 h,模型组与对照组(JS 1单培养)和正常组相比α-SMA mRNA的表达明显增加(P值均<0.01);Col.ⅠmRNA表达也明显高于对照组和正常组(正常小鼠肝脏CD8^(+)T淋巴细胞与JS 1共培养)(P值均<0.001)。扶正化瘀方组α-SMA mRNA和Col.ⅠmRNA表达显著低于模型组(P值均<0.01)。结论扶正化瘀方能通过改变小鼠肝脏CD8^(+)T淋巴细胞功能表型间接抑制活化的肝星状细胞。

摘要： 目的:柔肝方是上海市名中医王灵台教授治疗肝纤维化的临床有效验方,本研究旨在探讨柔肝方通过抑制纤维化蛋白(FBRS)抗肝纤维化的分子机制。方法:质谱法鉴定柔肝方的化学成分及其入血成分。BALB/c小鼠随机分对照组、模型组、柔肝方高剂量组、柔肝方中剂量组和柔肝方低剂量组。通过尾静脉注射ConA(12.5 mg/kg),每周1次,共10周,建立肝纤维化小鼠模型。体外应用重组FBRS蛋白刺激人肝星状细胞系(LX2细胞),并用柔肝方大鼠药物血清干预。肝组织HE染色、天狼猩红染色和Masson染色。生化法检测血清ALT、AST、肝纤四项(LN、HA、PⅢNP、Col-Ⅳ)表达水平。Western blot法检测肝组织α-SMA,Western blot法和ELISA法检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、TGF-β1、FBRS的表达水平。结果:各剂量柔肝方均可减少ConA肝纤维化模型小鼠肝脏的胶原沉积,且呈剂量依赖性抑制;柔肝方可明显降低模型小鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、Col-Ⅰ和FBRS的表达水平;体外应用重组FBRS蛋白可上调LX2细胞的α-SMA、TGF-β1、Col-Ⅰ和FBRS的表达,柔肝方药物血清可抑制FBRS介导的LX2细胞的活化及胶原表达。质谱分析鉴定淫羊藿苷、丹酚酸B、绿原酸是柔肝方中含量较高的活性成分。结论:柔肝方通过下调肝星状细胞FBRS的表达抑制其活化及胶原沉积,发挥抗肝纤维化作用。

摘要： 肝纤维化是肝脏长期受到各种急、慢性损伤导致肝星状细胞激活、细胞外基质生成与降解失衡并在肝脏沉积的一种病理学过程,受多条细胞信号转导通路和一系列细胞信息分子网络共同控制。如未行有效的治疗干预,随着病情的发展形成肝纤维结节并破坏正常的肝脏结构与功能,最终发展为肝硬化,出现肝功能的衰退,甚至演变为肝癌。本文着重介绍目前研究较明确和相对热点的肝纤维化信号通路、受体、非编码RNA及其对应的抗肝纤维化药物/分子的研究进展。

摘要： 目的探讨PAX6通过丝裂原活化蛋白激酶(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路抑制肝星状细胞活化和增殖的效果。方法取LX2肝星状细胞,分为对照组、PAX6 inhibitor组和PAX6 mimics组。采用CCK-8试剂盒测定细胞增殖,采用油红O染色测定细胞分化水平,使用流式细胞仪分析细胞凋亡,采用RT-PCR法和蛋白印迹法测定细胞PAX6、MEK和ERK mRNA和蛋白表达水平。结果PAX6 inhibitor组细胞PAX6 mRNA水平、凋亡率和G1期分别为(1.49±0.23)、(2.70±0.85)%和(59.02±1.25)%,显著低于LX2肝星状细胞组【分别为(1.85±0.19)、(3.40±0.47)%和(64.66±1.41)%,P<0.05】,而细胞增殖、存活率、分化率、MEK和ERK mRNA和蛋白水平分别为(0.79±0.03)、(73.35±9.74)%、(49.37±4.24)%、(2.55±0.43)、(3.90±0.49)、(0.89±0.15)和(1.17±0.17),显著高于LX2肝星状细胞组【分别为(0.58±0.05)、(60.74±9.24)%、(29.35±4.47)%、(2.67±0.47)、(4.55±0.50)、(0.74±0.14)和(1.35±0.16),P<0.05】;PAX6 mimics组细胞PAX6 mRNA水平、凋亡率和G1期分别为(2.67±0.20)、(6.70±1.04)%和(66.38±1.35)%,显著高于LX2肝星状细胞组【分别为(1.85±0.19)、(3.40±0.47)%和(64.66±1.41)%,P<0.05】,而细胞增殖、存活率、分化率、MEK和ERK mRNA和蛋白水平分别为(0.40±0.04)、(52.24±5.57)%、(13.85±3.35)%、(1.94±0.53)、(1.45±0.42)、(0.53±0.15)和(0.53±0.16),显著低于LX2肝星状细胞组【分别为(0.58±0.05)、(60.74±9.24)%、(29.35±4.47)%、(2.67±0.47)、(4.55±0.50)、(0.74±0.14)和(1.35±0.16),P<0.05】。结论PAX6过表达可抑制肝星状细胞活化和增殖,促进其凋亡,其机制可能与PAX6过表达可抑制肝星状细胞MEK和ERK表达进而抑制了MEK/ERK通路的激活有关。

摘要： 目的探讨经典型肝局灶性结节状增生(FNH)中央瘢痕的细胞组织学机制。方法从手术切除的具有中央瘢痕的FNH标本中分离出活化的肝星状细胞。采用细胞免疫荧光法及定量逆转录聚合酶链反应检测特定的细胞骨架标记物,如α-SMA、Collagen l和MMP-2。同时,收集有或无中央瘢痕的28例FNH样本,采用免疫组织化学染色和双免疫荧光标记法检测α-SMA、Collagen l的表达情况。结果FNH标本分离的肝星状细胞在培养期间具有肌成纤维细胞样的形态,同时高表达desmin,α-SMA,collagen I and MMP-2。同时,在FNH组织中可检测到中央瘢痕区域α-SMA,collagen I蛋白的共表达,且与组织大小显著相关。结论本研究首次基于细胞学-组织学水平上探讨FNH组织中央瘢痕形成的潜在机制,研究结果可为经典型FNH及中央瘢痕的形成提供实验资料。

摘要： 外基质(特别是胶原)合成增加和降解减少的结果,取决于二者的动态平衡。肝纤维化由肝星状细胞(或Ito细胞)活化启动;肝细胞、血小板细胞以及肝窦内皮细胞的破坏,导致肝枯否细胞中多种细胞因子分泌,参与纤维化形成。肝星状细胞是肝脏细胞外基质的主要来源,其一旦活化,即转分化为肌成纤维细胞,伴细胞外基质合成增加、大量沉积,导致肝纤维化。

摘要： 目的:探讨大鼠肝纤维化病理过程中肝组织及在体肝星状细胞(HSC)的含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP1)表达变化与在体HSC活化及增殖的关系。方法:随机将50只健康雄性SD大鼠分为对照组(10只)、模型组(40只),采用腹腔注射四氯化碳法建立大鼠肝纤维化模型,Masson三色染色及HE染色检测大鼠肝脏组织的病理组织学变化,SHP1与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光双标记检测大鼠肝组织中活化HSC的SHP1表达,免疫组织化学染色检测大鼠肝组织的α-SMA及SHP1表达,并分别对大鼠肝组织的SHP1表达及大鼠肝组织中活化HSC的SHP1表达与大鼠肝组织的α-SMA表达进行Pearson’s相关性分析。结果:大鼠肝纤维化模型成功构建,随着造模时间延长,大鼠肝纤维化逐渐加重。与对照组大鼠肝组织的SHP1阳性表达平均光密度值(MOD)(0.08±0.01)比较,造模不同时间(2周、4周、6周、8周)大鼠纤维化肝组织的SHP1阳性表达MOD(0.11±0.01、0.14±0.01、0.16±0.01、0.19±0.01)显著增加(P<0.05),并逐渐升高(P<0.05)。与对照组大鼠肝组织的α-SMA阳性表达MOD(0.04±0.01)比较,造模不同时间(2周、4周、6周、8周)大鼠纤维化肝组织的α-SMA阳性表达MOD(0.06±0.01、0.09±0.01、0.12±0.01、0.16±0.02)明显增加(P<0.05),并逐渐升高(P<0.05),即在体HSC的活化及增殖逐渐加快(α-SMA是HSC的活化标志)。SHP1与α-SMA免疫荧光双标记检测显示,造模2周、4周、6周、8周大鼠纤维化肝组织中表达SHP1的活化HSC占总的活化HSC的百分比(26.49%±3.44%、37.14%±4.57%、44.90%±2.94%、58.09%±5.33%)逐渐升高(P<0.05)。上述大鼠纤维化肝组织的SHP1表达及大鼠纤维化肝组织中表达SHP1的活化HSC占总的活化HSC的百分比均与大鼠纤维化肝组织的α-SMA表达呈显著正相关(r值为0.926,0.984,P<0.05)。结论:在大鼠肝纤维病理过程中,肝组织及在体HSC的SHP1表达与在体HSC的活化及增殖呈显著正相关。

摘要： 目的 探讨二乙基二硫代氨基甲酸(DDC)对肝星状细胞(HSCs)中脂滴蛋白Perilipin 5(Plin5)表达的调控作用及对HSCs活化的影响。方法 将雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为3组:对照组给予正常饮食喂养;模型组给予胆碱缺乏、L-氨基酸替代蛋白饲料(CDAA)喂养,建立非酒精性脂肪性肝炎(NASH)纤维化模型;治疗组给予DDC灌胃治疗。GFAP和Plin5免疫荧光双染观察小鼠肝组织HSCs中Plin5表达,明确DDC对HSCs中Plin5表达的调控作用。应用DDC处理人肝星状细胞系LX-2,Real-time PCR方法检测Plin5表达,脂滴染色观察脂滴变化,明确DDC对LX-2细胞Plin5表达及脂滴形成的影响;Real-time PCR方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅲ型胶原等的表达,明确DDC对LX-2细胞活化的影响。结果 在CDAA饮食诱导的NASH肝纤维化小鼠肝组织中,Plin5在HSCs中的表达较对照组显著降低;与模型组相比,DDC治疗组小鼠肝组织中Plin5在HSCs中表达显著升高。与对照组相比,DDC组处理12 h及24 h时,Plin5的mRNA相对表达量均显著增高(1.00±0.15 vs.1.93±0.70;1.00±0.33 vs.1.86±0.09),差异有统计学意义(P <0.05)。同时,LX-2脂滴染色结果显示,与对照相比,DDC组处理后LX-2细胞中脂滴数量显著增多[(0.71±0.12)%vs.(1.32±0.15)%],差异有统计学意义(P <0.05),且脂滴多位于细胞核周围,提示DDC可促进LX-2细胞恢复静止状态。与对照组相比,DDC组处理12 h及24 h时可显著抑制LX-2细胞中α-SMA、Ⅲ型胶原表达(1.00±0.07 vs.0.36±0.21;1.00±0.12 vs.0.66±0.02;1.00±0.04 vs.0.63±0.26;1.00±0.15 vs.0.76±0.07),差异均有统计学意义(P <0.05),提示DDC可抑制LX-2活化。结论 DDC可以上调HSCs中Plin5表达,促进脂滴形成并抑制HSCs活化。

摘要： 制备整合素αvβ3受体靶向超声/CT双模态纳米粒造影剂,检测其基本性质,并通过体外实验探讨其双模态显像能力及对大鼠肝星状细胞的靶向作用.

摘要： 目的：探讨鳖甲煎改良方(modified turtle shell decoction,MTSD)对肝星状细胞T6(hepatic stellate cell T6,HSC-T6)的TGFβ1、Smad3及Smad7表达的影响. 方法：将含生药量为0.71g/ml的MTSD处理HSC-T6作实验组,以和MTSD剂量相同的鳖甲煎丸(turtle shell pills,TSP)处理的HSC-T6为阳性对照,常规培养的HSC-T6作正常对照.倒置显微镜下观察比较各组HSC-T6的形态变化.CCK-8检测各组HSC-T6细胞的生长情况,并绘制其生长曲线;采用Real time-PCR、免疫荧光细胞化学及Western blotting技术分别检测各组HSC-T6的TGFβ1、Smad3及Smad7基因及其编码蛋白的表达变化. 结果：倒置显微镜下观察显示,与阳性对照细胞比较,MTSD处理48h的HSC-T6,胞体变小,部分细胞死亡碎裂.CCK-8检测证实,MTSD对HSC-T6生长具有抑制作用,与对照比较,MTSD处理的HSC-T6的生长减慢,48h开始其差异具有统计意义(P＜0.01).Real time-PCR、免疫荧光细胞化学及Western blotting检测显示,MTSD能在mRNA及蛋白水平明显下调HSC-T6的TGFβ1、Smad3的表达,上调其Smad7的表达,与对照相比,其差异均具统计学意义(P＜0.01). 结论：MTSD能有效抑制HSC-T6的生长,下调其TGFβ1、Smad3的表达,同时使其Smad7的表达上调.

摘要： 目的:研究钙离子载体A23187对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激的肝星状细胞凋亡的影响,旨在从内质网途径探讨细胞凋亡机理. 方法:将液氮保存下的肝星状细胞株,于37°C、5％CO2孵箱中进行复苏传代培养,同步化后将细胞分为5组:空白组、TGF-β1(5×10-9mg/l)组、TGF-β1(5×10-9mg/L)+低、中、高剂量钙离子载体A23187(1uM、2uM、4uM)组,即5×106mg/L TGF-β1刺激24h,再分别加入1uM、2uM、4uM不同剂量钙离子载体A23187作用24h后,用流式细胞仪检测细胞凋亡的改变情况、激光共聚焦检测细胞内钙离子的变化、免疫细胞化学法检测caspase-12蛋白表达、蛋白免疫印记测定GRP78、caspase-9蛋白的表达. 结果:流式细胞仪检测细胞凋亡发现,空白组、TGF-β1组、TGF-β1+低、中、高剂量钙离子载体A23187凋亡率分别为(3.32±0.29)％、(1.70±0.14)％、(5.76±0.22)％、(11.39±0.54)％、(15.14±0.79)％,组间两两比较显示差异均有统计学意义(P＜0.05).随着钙离子A23187剂量的增加,细胞内Ca2+浓度及GRP78、caspase-9、caspase-12蛋白表达明显增加(P＜0.05). 结论:钙离子载体A23187升高了细胞内Ca2+,激活ERS途径促进肝星状细胞的凋亡.

摘要： 目的:体外研究双氢青蒿素(DHA)对人肝星状细胞(HSCs)坏死性凋亡的影响及机制.rn 方法:HSCs分为对照组以及DHA处理组.应用噻唑蓝(MTT)、细胞计数试剂盒-8(CCK-8)以及亚甲基蓝染色检测HSCs的细胞活力.酶联免疫吸附实验检测HSCs培养基中HMGB1含量.Real-time PCR检测细胞内HMGB1 mRNA水平.细胞Titer-Glo试剂盒检测HSC内ATP含量.LDH试剂盒检测培养基中LDH含量.Real-time PCR和western blot分别检测受体相互作用蛋白l(RIPl)、RIP3和核因子E2相关因子2(Nrf2)的mRNA和蛋白水平.Western blot实验检测MLKL的磷酸化水平.免疫荧光实验观察HSC内Nrf2蛋白表达及亚细胞分布.rn 结果:DHA剂量依赖性地降低HSCs的活力.DHA剂量依赖性地促进HSCs释放HMGB1和LDH,升高HSCs内HMGB1的mRNA水平,降低细胞内ATP水平.DHA剂量依赖性地促进RIP1、RIP3的mRNA和蛋白表达,并促进MLKL的磷酸化.DHA以剂量依赖性的方式促进HSCs内Nrf2的mRNA和蛋白表达,并促进Nrf2从细胞质中向细胞核中转移.Nrf2 siRNA转染HSCs后可削弱DHA的上述作用,但Nrf2过表达质粒转染HSCs后可以模拟DHA的作用并与其产生协同效应.rn 结论:结果表明DHA可诱导HSCs的坏死性凋亡.这一作用可能与激活HSCs内Nrf2信号分子相关.本研究为DHA抗肝纤维化研究提供了新思路,同时为将DHA开发为坏死性凋亡相关的抗肝纤维化潜在药物提供了坚实的实验基础.

摘要： 目的：通过研究鳖甲寡肽对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)中wnt信号通路信号分子β-catenin、GSK-3β及下游靶基因表达的影响,探讨鳖甲寡肽抗肝纤维化的作用机制. 方法：用含不同浓度(0、0.6、1.2、2.5、5mg/ml)鳖甲寡肽培养基培养永生化HSC-T6细胞,培养24h后采用Western blotting法检测HSC-T6细胞Wnt/β-catenin信号分子β-catenin、GSK-3β的表达水平,WB检测下游靶基因α-SMA,elisa法检测MMP-2和MMP-9的表达水平. 结果：与空白组相比,药物组β-catenin蛋白的表达水平显著降低(P＜0.05).同时,鳖甲寡肽能够抑制α-SMA的表达(P＜0.05),并促进MMP-2和MMP-9的表达(P＜0.05),且这种调控作用具有浓度依赖性. 结论：鳖甲寡肽抗肝纤维化的药理作用可能与其下调HSC-T6细胞中Wnt/β-catenin信号通路的信号分子β-catenin的表达水平,并有效调控下3游靶基因α-SMA、MMP-2和MMP-9的表达水平密切相关,这可能是鳖甲寡肽抑制肝星状细胞增殖、活化的重要分子机制之一.

摘要： 目的：通过研究鳖甲煎丸药物血清对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)中β-catenin的表达水平及NF-κB信号通路的活化的调控作用,探讨鳖甲煎丸抗肝纤维化的作用机制. 方法：用鳖甲煎丸药物血清培养永生化HSC-T6细胞,培养24h后采用qPCR检测HSC-T6细胞中β-catenin mRNA的表达水平,免疫荧光检测β-catenin蛋白的表达水平,Western blotting检测p65、p50的表达水平,ELISA检测下游靶基因TGF-β和TNF-α的表达水平. 结果：与NC组及BC组相比,L、M、H和P组β-catenin mRNA的表达水平显著降低(P＜0.05),同时,鳖甲煎丸能够抑制p65的蛋白表达水平(P＜0.05),但对p50的的表达无显著影响,并可以显著抑制TGF-β和TNF-α的表达(P＜0.05),且这种调控作用具有浓度依赖性. 结论：鳖甲煎丸抗肝纤维化的药理作用可能与其5下调HSC-T6细胞中β-catenin的表达水平,调控NF-κB信号通路的活化,并有效抑制下游靶基因TGF-β和TNF-α的表达水平密切相关,这可能是鳖甲煎丸抑制肝星状细胞增殖、活化的重要分子机制之一.

摘要： 目的：通过研究鳖甲煎丸药物血清对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)中核转录因子-κB(NF-κB)信号通路信号分子NF-κB、IκB及下游靶基因表达的影响,探讨鳖甲煎丸抗肝纤维化的作用机制. 方法：使用鳖甲煎丸药物血清培养永生化HSC-T6细胞,培养24h后采用qPCR检测HSC-T6细胞中p65、p50、VEGF、TIMP-1mRNA的表达水平,免疫荧光法检测HSC-T6细胞中p65的表达水平,Western blotting检测信号分子IκBα、IκBβ及下游靶基因α-SMA的表达水平. 结果：与空白对照组(BC组)及阴性对照组(NC组)相比,中剂量组(M组)、高剂量组(H组)及秋水仙碱对照组(P组)p65、VEGF mRNA的表达水平显著降低(P＜0.05),低剂量组(L组)、M、H及P组TIMP-1mRNA的表达水平显著降低(P＜0.05),但对p50mRNA的表达无显著影响.免疫荧光显示与NC组相比,M、H及P组p65在细胞质中的表达降低.同时,鳖甲煎丸能上调IκBα的蛋白表达水平(P＜0.05),但对IκBβ的表达无显著影响,并能够显著抑制下游靶基因α-SMA的表达(P＜0.05),且具有浓度依赖性. 结论：鳖甲煎丸能够抑制HSC-T6的活化、增殖,这种作用与鳖甲煎丸能够下调HSC-T6细胞中p65的表达水平,上调IκBα的表达水平,进而影响NF-κB信号通路的活化,并有效抑制下游靶基因α-SMA、VEGF、TIMP-1的表达水平密切相关.因此,鳖甲煎丸可能通过调控NF-κB信号通路的活化达到抗肝纤维化的目的.

摘要： 肝纤维化的发生机制十分复杂,但主要是由于肝细胞外基质的过度增生和降解减少造成,而肝星状细胞是合成肝细胞外基质的主要细胞,在肝纤维化的发生发展过程中起着非常重要的作用.罗汉果是药食两用的广西特产中药材,罗汉果甜苷是其主要成分,对大、小鼠的急慢性肝损伤均有保护作用,可通过抑制肝星状细胞HSC-T6增殖及肝纤维化相关基因发挥作用.研究了罗汉果甜苷对肝星状细胞凋亡、细胞周期和细胞外基质的影响,为进一步阐明其抗纤维化作用机制提供依据.

摘要： 肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)是由于肝组织和细胞发生变性坏死及各种炎症刺激时,肝星状细胞(HSC)被激活,转变为肌成纤维细胞,合成大量的细胞外基质(extracellular matrix,ECM),导致肝脏中胶原等细胞外基质的沉积与降解失去平衡,使肝内细胞外基质性纤维异常沉积的病理过程.肝纤维化是各种慢性肝病的共同病理基础,是发展到肝硬化的必经阶段,因此在肝纤维化阶段对肝脏疾病的干预尤为重要,目前运用中医药研究治疗肝纤维化已成为新的发展趋势.

摘要： 肝纤维化是一种可逆性创伤-修复反应,表现为损伤区域细胞外基质沉积或"瘢痕"形成,肝星状细胞(HSC)的激活是肝纤维化发生发展的中心环节,血小板源性生长因子(PDGF)是肝纤维化发展过程中最重要的细胞因子,PDGF作为目前最强的促HSC增殖和活化的细胞因子,本文就PDGF在肝纤维化中所涉及的主要细胞信号通路进行综述.主要包括Ras/ERK、PI3-K、JAK/STAT、钙通道、Na+/H+途径等，他们都参与细胞的生长发育过程。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及脂肪间充质干细胞向肝星状细胞和肝内皮细胞同时分化的培养基及方法。本发明提供的培养基能够将脂肪间充质干细胞诱导同时分化成为星状细胞和肝内皮细胞，实验操作简单，干细胞来源广泛。以本发明提供培养基对脂肪干细胞诱导分化的效果要显著优于对照试验，且分化而来的两种细胞都具备其典型功能和表达关键基因。结果表明，本发明提供的培养基诱导分化23天后，有9.6％的细胞分化为肝星状细胞类似的细胞，有14.3％的细胞成为人类肝内皮细胞类似的细胞。

摘要： 本发明公开了一种从胚胎干细胞分化获得肝星状细胞的方法。采用该方法制备的肝星状细胞，质量稳定，安全性高，为组织工程、药物开发和细胞治疗提供大量的细胞来源。本发明制备的肝星状细胞具有肝星状细胞静息态和活化态的特性；可以被TAA活化，能够模拟药物(如TAA)导致肝纤维化的过程；可以被APAP活化，能够模拟药物(如APAP)引起的肝毒性肝星状细胞激活。由此可见，本发明提供的方法制备的肝星状细胞可以作为细胞模型筛选治疗肝纤维化药物。本发明具有重要的应用价值。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及脂肪间充质干细胞向肝星状细胞和肝内皮细胞同时分化的培养基及方法。本发明提供的培养基能够将脂肪间充质干细胞诱导同时分化成为星状细胞和肝内皮细胞，实验操作简单，干细胞来源广泛。以本发明提供培养基对脂肪干细胞诱导分化的效果要显著优于对照试验，且分化而来的两种细胞都具备其典型功能和表达关键基因。结果表明，本发明提供的培养基诱导分化23天后，有9.6％的细胞分化为肝星状细胞类似的细胞，有14.3％的细胞成为人类肝内皮细胞类似的细胞。

摘要： 本发明提供一种SD大鼠肝脏库普弗细胞和肝星状细胞原代分离、培养方法，包括步骤：(1)麻醉和抗凝；(2)插管；(3)原位灌注；(4)体外消化并获取总细胞悬液；(5)KC和HSC的纯化、分离；(6)细胞培养及形态观察；(7)存活率检测；(8)细胞鉴定。本发明使用健康成年SD雄鼠，200～350g，通过原位灌注、消化和体外消化、梯度离心和差速贴壁分离法，达到了存活率可达到95％以上、纯度可达到90％以上等效果。

摘要： 本发明公开了一种从胚胎干细胞分化获得肝星状细胞的方法。采用该方法制备的肝星状细胞，质量稳定，安全性高，为组织工程、药物开发和细胞治疗提供大量的细胞来源。本发明制备的肝星状细胞具有肝星状细胞静息态和活化态的特性；可以被TAA活化，能够模拟药物(如TAA)导致肝纤维化的过程；可以被APAP活化，能够模拟药物(如APAP)引起的肝毒性肝星状细胞激活。由此可见，本发明提供的方法制备的肝星状细胞可以作为细胞模型筛选治疗肝纤维化药物。本发明具有重要的应用价值。

摘要： 本发明提供了一种特异性靶向活化肝星状细胞的CAR‑T细胞及其制备方法和应用，所述CAR包括抗原结合结构域、铰链区、跨膜结构域和信号传导结构域；所述抗原结合结构域为抗FAP单链抗体。本发明采用抗FAP单链抗体作为嵌合抗原受体的抗原结合结构域，表达所述嵌合抗原受体的T细胞对活化肝星状细胞具有显著的特异性靶向杀伤作用，拓展了细胞免疫疗法的应用范围，为临床治疗肝纤维化和非肿瘤疾病提供了新思路。

摘要： 本发明为一种泡球蚴感染动物中肝细胞与肝星状细胞的分离方法。一种泡球蚴感染动物中肝细胞与肝星状细胞的分离方法，包括：(1)原位灌注：在泡球蚴感染动物肝脏中，经门静脉，依次用前灌注液、后灌注液1和后灌注液2原位灌注肝脏后，取下肝脏制成肝内细胞悬液；(2)梯度离心：将肝内细胞悬液离心后，得上清液1和下层的沉淀物1；用D‑Hanks液离心洗涤沉淀物1，得肝细胞；将上清液1离心后，收集下层的沉淀物2；向沉淀物2中依次加入GBSS‑B、Nycodenz分离液、GBSS‑B，离心，收集白色的环状层，用GBSS‑B离心洗涤，弃上清液，得肝星状细胞。本发明所述的一种泡球蚴感染动物中肝细胞与肝星状细胞的分离方法，可同时提取分离出泡球蚴感染动物中的肝细胞与肝星状细胞。

摘要： 本发明公开了一种同时分离肝星状细胞及成纤维母细胞的方法，其特征是，包括如下步骤：将小鼠麻醉处死后，U型剖开腹腔，经门静脉，以胶原酶、蛋白酶灌注，肝脏变软后剥离肝包膜制成细胞悬液，Nycodenze梯度离心分离；吸取细胞层，加入大鼠抗小鼠THY1抗体，该抗体为0.2-0.25μg/L×10

摘要： 本发明涉及靶向肝星状细胞的仿生纳米药物的制备方法及其应用，可有效解决目前靶向肝星状细胞的纳米载体通常是利用化学修饰的方法将靶向配体修饰在纳米药物表面，合成较为繁琐的问题，其解决的技术方案是，利用肝星状细胞的同源靶向功能，包裹诱导肝星状细胞(HSCs)凋亡的疏水性小分子药物BAY 11‑7082，通过超声共挤出的方法得到具有肝星状细胞靶向的纳米药物，本发明仿生纳米药物可以诱导肝星状细胞凋亡，减少胶原分泌，缓解炎症微环境最终达到抗肝纤维化的目的，本发明制备方法简便，生物相容性好，是仿生纳米药物上的创新。

摘要： 本发明提供一种靶向肝星状细胞并抑制其激活的载药外泌体，所述载药外泌体由用于抑制肝星状细胞活化的抗纤维化药物导入到具有肝星状细胞靶向性的外泌体中获得，所述具有肝星状细胞靶向性的外泌体来源于胰腺癌细胞系。本发明提供的肝星状细胞靶向载药外泌体对肿瘤和肝星状细胞的体外增殖实验得到了预期安全的治疗效果，对肝星状细胞干预后的Western blot实验亦表明其可以抑制肝星状细胞活化。利用本发明的肝星状细胞靶向载药外泌体干预纤维化转移前生态位的形成，为抑制胰腺癌的肝转移提供可能，亦为其他肿瘤转移的治疗提供了启示。